¿Cuáles son las características de los principales métodos de separación y purificación de proteínas?
¿Cuáles son las características de los principales métodos de separación y purificación de proteínas?
Los métodos habituales de separación y purificación de proteínas son:
1. Precipitación,
p>2 , Electroforesis: Las proteínas se cargan en soluciones por encima o por debajo de su punto isoeléctrico y pueden moverse hacia el polo positivo o negativo del campo eléctrico en un campo eléctrico. Dependiendo del soporte, existen electroforesis en película fina, electroforesis en gel, etc.
3. Diálisis: Método que utiliza bolsas de diálisis para separar proteínas moleculares grandes de compuestos moleculares pequeños.
4. Cromatografía:
a. La cromatografía de intercambio iónico utiliza la naturaleza libre anfótera de las proteínas. A un pH específico, la carga y las propiedades de cada proteína son diferentes, por lo que se pueden separar. mediante cromatografía de intercambio iónico. Por ejemplo, en la cromatografía de intercambio aniónico, primero se eluyen las proteínas con pequeñas cargas negativas.
b. Tamiz molecular, también conocido como filtración en gel. Las proteínas de moléculas pequeñas entran en los poros y tienen un tiempo de residencia prolongado, mientras que las proteínas de moléculas grandes no pueden entrar en los poros y salen inmediatamente.
5. Ultracentrifugación: Puede utilizarse para separar y purificar proteínas y también para determinar el peso molecular de las proteínas. Las diferentes proteínas están separadas por sus diferentes densidades y formas.