La diferencia entre inmunohistoquímica e hibridación in situ

1. Diferentes definiciones

La inmunohistoquímica es la aplicación de los principios básicos de la inmunología: la reacción antígeno-anticuerpo, es decir, el principio de unión específica de antígenos y anticuerpos marcados. se obtienen mediante reacciones químicas. Los reactivos cromogénicos (fluoresceína, enzimas, iones metálicos, isótopos) se utilizan para determinar antígenos intracelulares (polipéptidos y proteínas) en las células de los tejidos y realizar investigaciones de localización, cualitativas y cuantitativas relativas, lo que se denomina tecnología de inmunohistoquímica. o células inmunes.

La hibridación in situ se refiere al proceso de hibridación de un ácido nucleico específicamente marcado de una secuencia conocida como sonda con ácidos nucleicos en células o secciones de tejido para localizar de forma precisa y cuantitativa una secuencia de ácido nucleico específica. La hibridación in situ se puede realizar en muestras de células o tejidos.

2. Diferentes funciones

Inmunohistoquímica: Las muestras, utilizadas principalmente en experimentos, son muestras de tejido y muestras de células. Las primeras incluyen secciones de parafina (secciones patológicas y chips de tejido) y cortes congelados. este último incluye impresiones de tejidos, portaobjetos de células y frotis de células.

Los anticuerpos, anticuerpos comúnmente utilizados en experimentos de inmunohistoquímica, son anticuerpos monoclonales y los anticuerpos policlonales son anticuerpos secretados por un clon de linfocitos B y se preparan inmunizando animales utilizando tecnología de hibridoma de fusión celular. Los anticuerpos policlonales son sueros inmunes obtenidos de sangre animal después de inmunizar directamente a los animales con antígenos purificados. Son una mezcla de anticuerpos producidos por múltiples clones de linfocitos B.

Los métodos de tinción más utilizados se dividen en inmunofluorescencia, marcaje inmunoenzimático e histoquímica de afinidad basada en diferentes marcadores. Este último se basa en una sustancia que tiene una alta afinidad por un determinado componente del tejido. Este método es más sensible y favorece la localización de trazas de antígenos (anticuerpos) a nivel celular o subcelular, entre los cuales la tinción con biotina-antibiotina es la más utilizada.

Hibridación in situ: localización de transcritos de ARNm específicos de células, que pueden usarse para estudiar mapas genéticos, expresión génica y evolución del genoma.

Detección y localización de ADN/ARN viral en; tejidos infectados, como la detección de ARNm del virus de Epstein-Barr, virus del papiloma humano y ADN del citomegalovirus;

Detección de la expresión y cambios de oncogenes, genes supresores de tumores y diversos genes funcionales a nivel de transcripción;

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Ubicación de genes en los cromosomas;

Detección de cambios cromosómicos, como anomalías en el número de cromosomas y translocaciones cromosómicas;

Investigación sobre citogenética de interfase , Como el diagnóstico prenatal de enfermedades genéticas y la identificación de genes portadores de determinadas enfermedades genéticas, el diagnóstico de determinados tumores y la dosimetría biológica, etc.

3. Diferentes significados

Inmunohistoquímica: En los últimos años, con el desarrollo de la tecnología de inmunohistoquímica y la aparición de diversos anticuerpos específicos, se han diagnosticado claramente muchos tumores difíciles. En el diagnóstico patológico de tumores de rutina, en el 5% -10% de los casos, es difícil hacer un diagnóstico morfológico claro mediante tinción H.E.

En particular, se ha reconocido generalmente el valor práctico de la inmunohistoquímica en el diagnóstico de tumores y el diagnóstico diferencial. Su precisión en el diagnóstico diferencial de tumores poco diferenciados o indiferenciados puede alcanzar el 50%-75%.

Hibridación in situ: Hibridación in situ: tecnología desarrollada a partir del estudio de los principios de replicación molecular del ADN. El principio básico es que dos fragmentos monocatenarios de nucleótidos pueden combinarse mediante enlaces de hidrógeno en condiciones adecuadas para formar moléculas de doble enlace ADN-ADN, ADN-ARN o ARN-ARN.

Uso marcado (con isótopos radiactivos, como 3H, 35S, 32P, fluoresceína, biotina, digoxina y otras sustancias no radiactivas) fragmentos de ADN o ARN como sondas de ácido nucleico, y combinarlos con el ácido nucleico a analizar (ARN) en secciones de tejido o células o ADN. ) fragmentos, y luego usar métodos como la autorradiografía para mostrarlos y observar la presencia y ubicación del ARNm o ADN objetivo bajo un microscopio óptico o un microscopio electrónico;

Usando tecnología de hibridación in situ, hibridación in situ Se puede realizar Estudiar la expresión de genes utilizados por las células para sintetizar determinados polipéptidos o proteínas. Este método tiene una alta sensibilidad y especificidad y puede explorar más a fondo la expresión funcional y los mecanismos reguladores de las células a nivel molecular. Se ha convertido en un medio importante para la investigación actual en biología celular y biología molecular.

Material de referencia: Enciclopedia Baidu-Hibridación in situ

Material de referencia: Enciclopedia Baidu-Inmunohistoquímica