¿Alguien conoce el método de paso de las cepas estándar?
Método de paso por cepa:
Inclinación de bacterias Inclinación de bacterias (almacenamiento):
El medio de cultivo debe prepararse recién si no hay agua condensada en la inclinación. , no se debe volver a utilizar. El nombre de la famosa bacteria y la fecha de inoculación se encuentran en la etiqueta. La pendiente de cepa extraída del refrigerador debe mantenerse a temperatura ambiente durante aproximadamente 30 minutos y luego trasladarse a la sala de inoculación o al banco de trabajo ultralimpio una vez equilibrada la temperatura.
Enciende la lámpara de alcohol, sujeta la pendiente de las bacterias con la mano izquierda, acerca la boca del tubo a la llama, sujeta el extremo posterior de la varilla de inoculación con la mano derecha, quema la inoculación. bucle rojo durante 30 segundos, y luego coloque todas las partes metálicas de la varilla de inoculación en la llama y pásela de un lado a otro 3 veces. Gire la boca del tubo sobre la llama con la mano izquierda y use la mano derecha para sujetar el tapón de algodón con el dedo anular, el meñique y la palma, retire el tapón de algodón, coloque el anillo de inoculación en el tubo, primero colóquelo contra Coloque el agar cerca de la pared, déjelo enfriar un poco y luego muévalo hacia En el césped de bacterias, raspe una pequeña cantidad de césped de bacterias, luego saque la varilla de inoculación y mueva la boca del tubo de bacterias hacia la llama.
Tape el tapón de algodón, baje el tubo de cepa con la mano izquierda, tome 1 tubo de agar nutritivo en pendiente, abra el tapón de algodón según la operación anterior, extienda el asa de inoculación dentro del tubo hasta la parte inferior. parte de la pendiente de agar, de abajo hacia arriba, Coloque el asa de inoculación ligeramente contra la superficie inclinada y muévala en zigzag para que las bacterias se rayen en la superficie inclinada.
Saque la varilla de inoculación, tape el tubo mediano con algodón junto a la llama y luego queme la varilla de inoculación inoculada con bacterias en la llama para esterilizarla.
Coloque los tubos bacterianos inoculados a 35~37°C durante 22~24 horas. Los tubos de molde generalmente se colocan en una incubadora de moho de 20~25°C durante 7 días. Después de sacarlo, guárdelo en el frigorífico y, normalmente, replántelo cada 3 meses.
Placa de aislamiento de caldo nutritivo inclinada para bacterias inclinada para bacterias
Si la morfología de la colonia no es típica, se puede purificar y se utiliza el siguiente método para pasar (aislar las colonias): Utilice un Asa de inoculación para tomar el tubo bacteriano mencionado anteriormente (pendiente). Inocular una pequeña cantidad de césped bacteriano en caldo nutritivo (5 ml/tubo, esterilizado), incubar a 35 ~ 37 ℃ durante 18 ~ 24 horas y luego usar un asa de inoculación para tomar la suspensión bacteriana del caldo nutritivo cultivado (líquido bacteriano concentrado), inocular en la placa de separación, cultivar a 35 ~ 37 ℃ durante 18 ~ 24 horas, usar una aguja de inoculación para seleccionar colonias típicas y sembrarlas en el agar nutritivo inclinado y cultivar a 35~37℃ durante 18~24 horas. Generalmente se inoculan varios tubos al mismo tiempo, uno de los cuales se utiliza para el posterior paso de las cepas o la inoculación en medio agar semisólido, y los demás se utilizan como cepas de trabajo.
Placas de aislamiento de uso común: Escherichia coli - placa de agar EMB
Pseudomonas aeruginosa - medio de agar bromuro de cetiltrimetilamonio
Staphylococcus aureus - medio de agar manitol cloruro sódico