Utilice primer premier5.0 para diseñar cebadores

Haz clic en el archivo, selecciona Nueva Secuencia de ADN (Archivo - Nuevo - Secuencia de ADN) y luego copia la secuencia en la que deseas diseñar el cebador (si quieres, puedes escribirlas una por una) , luego haga clic en Cebador para ingresar a la interfaz de diseño de cebador. Después de ingresar, seleccione Buscar para establecer las condiciones correspondientes, como por ejemplo: desea diseñar cebadores de amplificación por PCR o secuenciación, ya sea directo, inverso o bidireccional, y diseño y cebador. en esa posición en el fragmento, la longitud, etc., después de configurarlo, simplemente haga clic en Aceptar hasta el final, y luego habrá cebadores para que usted elija.

Jaja, pero los pasos específicos 1L parecen haberse dado en el sitio web, pero al diseñar cebadores, debes prestar atención a algunas condiciones, como el valor de TM y GC, así como la longitud del cebador. etc. ^_ ^

De todos modos, cuando diseño cebadores, normalmente controlo el TM y el GC entre 50-60, y la longitud suele ser de 18 o 19 bases (555 se carga según la base cuando se sintetiza), no coinciden No hay horquillas ni horquillas, pero si hay dímeros de cebador, no es un gran problema (de todos modos, los cebadores que diseñé con dímeros están básicamente bien, entonces es mejor no tener 4 o más consecutivos). bases, y luego hay No diseñar cebadores dentro de secuencias repetitivas.

Siempre que prestes atención a lo anterior, los cebadores diseñados estarán bien para secuenciación o amplificación

Jeje, espero que sea útil para LZ