Método de síntesis de fijación en fase sólida de polipéptidos
La característica más importante que separa la síntesis en fase sólida de otras tecnologías es el portador en fase sólida. El portador en fase sólida que se puede utilizar para la síntesis de péptidos debe cumplir los siguientes requisitos: debe contener un reactivo. sitio (o grupo reactivo), de modo que la cadena peptídica se una a estos sitios y pueda eliminarse más tarde debe ser estable a las condiciones físicas y químicas durante la síntesis; el portador debe permitir una transferencia rápida y sin obstáculos entre la cadena peptídica en crecimiento; y los contactos de los reactivos, además, el vehículo debe permitir la provisión de suficientes puntos de unión para dar un rendimiento útil de péptido por unidad de volumen del vehículo, y debe minimizar las interacciones entre las cadenas peptídicas unidas por el vehículo;
Existen tres tipos principales de portadores poliméricos utilizados para la síntesis de péptidos en fase sólida: resinas reticuladas de poliestireno-estireno, resinas de poliacrilamida, resinas de polietilenglicol y derivados únicamente mediante la introducción de grupos reactivos en la resina. ¿Se puede conectar directamente el (primer) aminoácido? Según los diferentes grupos reactivos introducidos, estas resinas y derivados de resinas se dividen en resina de clorometilo, resina de carboxilo, resina de amino o resina de hidrazida. El método de síntesis BOC generalmente elige resina de clorometilo, como la resina Merrifield; el método de síntesis FMOC generalmente elige resina carboxílica como la resina de Wang. La fijación de los aminoácidos se logra principalmente protegiendo el enlace de valencia positivo formado entre el grupo carboxilo del aminoácido y el grupo reactivo de la resina. Hay muchas formas de formar el enlace de valencia positivo: resina de clorometilo, generalmente la protectora El tetrametilamonio. luego se hace reaccionar directamente la sal o sal de sodio, sal de potasio o sal de cesio del aminoácido con la resina a una temperatura adecuada o se hace reaccionar en un disolvente orgánico adecuado tal como dioxano, DMF o resina carboxílica. Generalmente se añade un agente de condensación apropiado; como DCC o carboxidimidazol permite que el aminoácido protegido forme un éster con la resina para completar la fijación del aminoácido o la resina de hidrazida, después de agregar un agente de condensación apropiado como DCC, protege los enlaces de aminoácido formados. con la resina se completa la fijación de los aminoácidos.