¿Qué tipos de máquinas PCR existen y cómo elegir una?

Tipos de máquinas de PCR

Siempre existen varias clasificaciones. De forma general se pueden dividir en dos categorías: máquinas de amplificación por PCR y máquinas de PCR de fluorescencia en tiempo real. Las máquinas de PCR de fluorescencia semiautomáticas y en tiempo real, o completamente automáticas, o cualitativas y cuantitativas, son términos relativamente inexactos.

Lo más importante de la PCR es el proceso de aumento de temperatura y enfriamiento. La PCR en baño de agua original constaba de tres baños de agua y un brazo robótico, que periódicamente sacaba el tanque de reacción y cambiaba el baño de agua. Este tipo de cosas son grandes, rápidas y lentas, pero los resultados en realidad no son peores que los de las máquinas de PCR posteriores. Lo aprecio ahora. Más tarde, alguien utilizó refrigeración y calefacción para fabricar un instrumento de amplificación de PCR que sube y baja la temperatura en una posición fija.

Más tarde, con el desarrollo de la tecnología cuantitativa, algunas empresas integraron el instrumento de amplificación y detección, que se convirtió en lo que ahora se llama un instrumento de PCR totalmente automático (o cuantitativo). Por supuesto, el estándar se llama instrumento de PCR cuantitativa de fluorescencia en tiempo real.

Marcas

Todo tiene una marca Hay muchas marcas de máquinas de PCR en el país y en el extranjero. Las más famosas en el extranjero son:

ABI American Applied Biotechnology. Empresa: Aristocrat, una empresa biológica de larga trayectoria, adquirió el PE original, que es el creador de la PCR. Tiene muchas máquinas de PCR clásicas, incluidas 5700 (descontinuada), 7700 (descontinuada), 7000, 7900 y otras de fluorescencia en tiempo real. Instrumentos de PCR cuantitativa.

ROCHE Diagnostics: LIGHTCYCLER, una empresa emergente, es su único instrumento de PCR. Está funcionando muy bien en el mercado y se centra principalmente en la investigación científica. Sin embargo, se utiliza en muchos hospitales de China. Características especiales como centrifugación, calentamiento de gas, tubos capilares, etc., tienen un diseño alternativo y son los instrumentos de PCR más distintivos. Por supuesto, su calidad es otra cuestión, pero su capacidad técnica y su coraje para encontrar nuevas formas son dignos de admirar. .

MJ: Una nueva celebridad en China. Los instrumentos de amplificación de MJ son bien conocidos en el campo de la investigación en ciencias biológicas. Sus productos son más adecuados para pruebas de alto rendimiento y se utilizan ampliamente en el Proyecto Genoma Humano. El instrumento de PCR de fluorescencia en tiempo real acaba de ingresar a China no hace mucho y su característica es que puede usar diferentes temperaturas entre pozos. En realidad, esto es más útil.

Bole: Hola, McDonald's barato, ICYCLER es su producto principal. Ha estado en China durante mucho tiempo. El producto es el mismo que el 5700. Se fabrica agregando un módulo cuantitativo al instrumento de amplificación. Se caracteriza por su menor precio.

Hay muchas empresas que hacen esto en China, como Hangzhou Bioer, Hangzhou Longi, Shanghai Fengling, Xiamen Ampli, etc.

Compra

Para ser precisos, incluida la cuantificación de fluorescencia en tiempo real, no existe un sistema automático de adición y procesamiento de muestras, y solo puede considerarse semiautomático. La máquina de PCR es algo simple, solo un dispositivo de control de temperatura y un dispositivo de detección.

En cuanto al control de temperatura, es principalmente un tema mediático. El medio ideal es algo con buena conductividad térmica, calor específico alto y contacto cercano.

Los mejores a este respecto son los baños de agua y los baños de aceite, que tienen un gran calor específico (el aceite es más grande que el agua), solvatan objetos y están en contacto perfecto con los reactivos, por lo que el efecto es, por supuesto, el mejor. Sin embargo, la automatización y la miniaturización son difíciles y inicialmente sólo se utilizó el tipo de baño de agua.

El calentamiento con silicio es el tipo más utilizado. Sus ventajas son: fácil automatización, velocidad rápida, calentamiento y enfriamiento directos. El efecto es, por supuesto, bueno, pero, en primer lugar, el costo es mayor y, en segundo lugar, el. El medio utilizado es metal, aunque la conductividad térmica es buena, es difícil lograr un contacto perfecto con el tubo de reacción en el período cualitativo, puede agregar aceite, pero use fluorescencia para determinar el máximo, porque el aceite tiene una señal fluorescente. y no se puede utilizar. Entonces es un poco peor en términos de contacto fluido. En tercer lugar, dado que se calienta en la parte inferior, la presión en la parte inferior es relativamente grande y existe la posibilidad de que se desborde. Sin embargo, el nuevo instrumento resuelve este problema después de calentar la cubierta.

Para calentar aire, utilizar aire como medio tiene la ventaja de un contacto perfecto con el sistema de reacción, pero el aire tiene debilidades obvias debido a su mala conductividad térmica y su bajo calor específico. Por lo tanto, el calentamiento del aire debe utilizar centrifugación para generar flujo de aire y mejorar la conductividad térmica. Al mismo tiempo, se deben usar tubos capilares para aumentar el área de contacto y micronizar los reactivos para compensar. Después de hacer esto, el efecto sigue siendo bueno. Sin embargo, algunos fabricantes hablan mucho de las ventajas de los tubos centrífugos y capilares, pero guardan silencio sobre las desventajas de la calefacción por gas. Esta es una técnica de marketing inteligente. Al mismo tiempo, el uso de la centrifugación tiene un impacto en el aumento del volumen de la muestra. Cuanto mayor es el volumen de la muestra, más obvia es la debilidad del pequeño calor específico del aire, por lo que el volumen de muestra del instrumento calentado por el aire es. relativamente pequeño.

Después de usar un tubo capilar, el área de contacto entre la solución de reacción y el tubo aumenta y el fenómeno de adsorción aumenta. Por lo tanto, el reactivo tiene poca versatilidad y generalmente necesita un desarrollo especial y el costo es alto aunque la dosis del reactivo es pequeña. , al ser un reactivo especial, cada ración se basa en la cantidad real. El cálculo no ahorra reactivos. En cambio, aumenta el costo capilar.

En cuanto a las funciones, todas las máquinas PCR tienen aproximadamente las mismas funciones. Solo los orificios MJ pueden usar diferentes temperaturas, lo cual es único, lo cual es útil para la detección simultánea de múltiples elementos y el ajuste de los parámetros del ciclo. Sin embargo, el instrumento de fluorescencia en tiempo real acaba de ingresar a China, por lo que aún se desconocen los detalles.

En cuanto a la compra, depende de la situación de la unidad. Dado que el contenido técnico de PCR en realidad no es alto, los buenos instrumentos nacionales como Hangzhou Bioer (relacionado con el famoso fabricante japonés Yamato) no lo son demasiado. diferente. En cuanto a los instrumentos importados, los instrumentos de Roche son buenos, pero si el volumen de la muestra es grande, no se recomienda utilizar Roche. Uno quedará exhausto. Además, la curva estándar y los costes de control compartidos por cada muestra son demasiado elevados. Al mismo tiempo, los reactivos también son relativamente limitados.