Preparación de la solución CTAB
Método de preparación de la solución CTAB:
1. Pesar 0,5 g de polvo de CTAB, añadir 100 ml de agua bidestilada y agitar bien para disolver.
2. Añadir NaCl 1M hasta una concentración final de 1,4M, es decir, añadir 14ml de NaCl 1M por cada 100ml de solución de CTAB.
3. Añadir 20 μl de β-mercaptoetanol/ml de solución de CTAB, es decir, añadir 200 μl de β-mercaptoetanol a cada 100 ml de solución de CTAB.
4. Utilice HCl para ajustar el valor del pH a 8,0, es decir, agregue aproximadamente 1,6 ml de HCl 1 M a cada 100 ml de solución CTAB.
5. Transfiera la solución de CTAB preparada a un recipiente del tamaño adecuado, ciérrelo con film transparente y guárdelo a temperatura ambiente.
Al preparar la solución CTAB, evite el contacto con la piel y los ojos para evitar irritaciones y daños. Al mismo tiempo, se debe usar equipo de protección como guantes y gafas durante la operación para garantizar la seguridad. Además, cuando se utiliza la solución CTAB para extraer ácidos nucleicos, se debe seleccionar la concentración y el volumen adecuados según las necesidades experimentales para lograr el mejor efecto de extracción.
Función de la solución CTAB:
1. Agente lisante de la membrana celular: CTAB puede destruir la membrana celular y liberar el contenido de la célula, facilitando así más operaciones experimentales en las células.
2. Agente de extracción de ácidos nucleicos: utilizando la capacidad de unión de CTAB a los ácidos nucleicos, se puede extraer eficazmente ADN o ARN de las células. Al mismo tiempo, también se puede utilizar para eliminar proteínas en soluciones.
3. Agente precipitante de proteínas: CTAB puede combinarse con proteínas para formar un precipitado, eliminando así las proteínas de la solución. Esta propiedad se utiliza a menudo en la purificación y análisis de proteínas.
4. Intercambiador de iones: CTAB se puede utilizar como intercambiador de iones en experimentos como la cromatografía de intercambio iónico para ayudar a separar y purificar sustancias objetivo.
5. Como detergente: CTAB puede disolver las membranas celulares y formar complejos con los ácidos nucleicos. En soluciones con alto contenido de sal, los complejos que forma con los ácidos nucleicos son solubles, pero cuando se reduce la concentración de sal de la solución, los complejos precipitarán fuera de la solución, de modo que los complejos CTAB-ácido nucleico se pueden separar de las proteínas y polipéptidos por centrifugación.