¿Cómo seleccionar y utilizar correctamente anticuerpos secundarios para inmunohistoquímica?

1 La fuente de la especie debe coincidir: Seleccione el anticuerpo secundario según el anticuerpo primario utilizado. En términos generales, si el anticuerpo primario es de origen murino, el anticuerpo secundario debe ser un anticuerpo anti-ratón de conejo/cabra u otra especie. Actualmente, la empresa estadounidense Vector y Zymed han desarrollado kits que utilizan anticuerpos de ratón para detectar tejidos de ratón, es decir, los anticuerpos primarios se derivan de ratones. El kit utiliza una solución de bloqueo universal no específica y una solución de bloqueo de Ig de ratón endógena patentada. Puede obtener un fondo de tinción claro.

2. Preste atención a los isotipos y subtipos de anticuerpos: después de determinar el isotipo y subtipo del anticuerpo primario, puede elegir una Ig de amplio espectro de la especie fuente del anticuerpo primario o un anticuerpo secundario que se dirija al primario. subtipo de anticuerpo. Si el anticuerpo primario es IgG1 de ratón, puede utilizar un anticuerpo secundario IgG1 anti-ratón de cabra o IgG1 de cabra.

3. Uso correcto: También es necesario volver a seleccionar la proporción de dilución. Generalmente, la proporción de dilución proporcionada por los proveedores comienza con una dilución de 1:10 y se diluye hasta 5 veces.

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