Red de conocimiento del abogados - Respuesta a la Ley de patrimonio - ¿Se puede conservar la cromatina después del entrecruzamiento? La cromatina puede conservarse tras la reticulación. La tecnología de captura de conformación de cromatina (3C y Hi-C) y sus tecnologías derivadas (DNase Hi-C y Micro-C) encuentran y analizan la forma plegada de los cromosomas en diferentes niveles y resoluciones. Las tecnologías de captura de la conformación de la cromatina existentes dependen del formaldehído para entrecruzar proteínas y ADN, cortando el ADN mediante endonucleasas de restricción o DNasa, Mnasa y luego reuniendo el ADN espacialmente adyacente. La biblioteca de ADN religada se analizará y comparará mediante secuenciación de alto rendimiento para dibujar un mapa de interacción de la cromatina. A través de este diagrama de intersección, se descubrieron muchas estructuras formadas por el plegamiento de los cromosomas, incluidos los bucles de cromatina1, las tiras estructurales de cromatina, los dominios de cromatina, los dominios topológicos2 y los compartimentos activos e inactivos3. Sin embargo, la reacción del ADN y las proteínas entrecruzados con formaldehído es reversible y los productos entrecruzados son inestables. Además, las proteínas entrecruzadas con el ADN pueden impedir que las enzimas de restricción reconozcan el ADN en el espacio, lo que resulta en una restricción incompleta del ADN. Por lo tanto, en diferentes células, los sitios de unión variarán, lo que aumenta en gran medida la heterogeneidad y, por lo tanto, aumenta el "fondo" en el gráfico cruzado de cromatina, lo que afecta el análisis correcto de la estructura de la cromatina. Además, en comparación con las endonucleasas de restricción, la DNasa y la MNasa pueden cortar el ADN en fragmentos más pequeños, por lo que las tecnologías de derivatización DNasa Hi-C y Micro-C basadas en DNasa y MNasa pueden mejorar en gran medida la resolución de los mapas cruzados de cromatina. Sin embargo, dado que el ADN y las proteínas todavía están entrecruzados por el formaldehído, la ADNasa y la MNasa estarán más inclinadas a cortar regiones abiertas de cromatina. Por tanto, la estructura cromosómica observada también estará sesgada.