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Historia de la investigación del diagnóstico de ácidos nucleicos

Reacción en cadena de la polimerasa

El estudio de los ácidos nucleicos tiene una historia de más de 100 años. A finales de los años 1960 y principios de los años 1970, la gente se dedicó a la investigación del aislamiento de genes in vitro. En 1971, Korana propuso por primera vez la idea de la amplificación de ácido nucleico in vitro: "Después de desnaturalizar el ADN, hibride con los cebadores apropiados, extienda los cebadores con ADN polimerasa y repita este proceso para clonar el gen del ARNt".

Un día de 1983, el científico estadounidense Kary Mulis conducía por una sinuosa carretera interestatal y nació el prototipo de la tecnología PCR. Demostró la idea de la PCR en experimentos, solicitó la primera patente sobre PCR en 1985 y publicó el primer artículo académico sobre PCR en la revista Science. Desde entonces, la tecnología PCR ha sido ampliamente reconocida por la comunidad de las ciencias biológicas, y Kary Mulis ganó el Premio Nobel de Química del 65438 al 0993. La ADN polimerasa que Mullis utilizó inicialmente fue el fragmento Klenow de la ADN polimerasa I de E. coli, pero su desventaja era que la enzima no era resistente a altas temperaturas y se desnaturalizaba e inactivaba a 90°C, por lo que era necesario agregarla nuevamente cada ciclo. En 1988, Zhaisi et al. extrajeron una ADN polimerasa termoestable de una bacteria termófila acuática aislada de aguas termales, superando esta deficiencia, haciendo así que la tecnología de PCR se utilice ampliamente y convierta a la PCR en un componente genético y fundamental del análisis molecular.

Tras más de diez años de desarrollo, la PCR se ha convertido en una tecnología de rutina en los laboratorios. Es un medio indispensable en la investigación moderna de biología molecular y un sistema de amplificación extremadamente sensible. En comparación con los métodos de diagnóstico clínico tradicionales, el diagnóstico de ácidos nucleicos es una tecnología de diagnóstico molecular que puede compensar algunas de las deficiencias de los métodos de diagnóstico clínico tradicionales. Por ejemplo, el diagnóstico de ácido nucleico puede revelar directamente la presencia de patógenos, reflejar objetivamente la infección y la actividad de los patógenos en el cuerpo humano y puede utilizarse como un método de seguimiento eficaz en el tratamiento clínico. Además, la tecnología de diagnóstico de ácidos nucleicos también puede detectar patógenos que son difíciles de detectar con métodos de detección convencionales, como superar el período ventana desde la infección hasta la producción de anticuerpos en la tecnología de inmunoensayo enzimático. Por lo tanto, la tecnología de diagnóstico de ácidos nucleicos representada por la tecnología de PCR se ha utilizado ampliamente en el diagnóstico clínico.