Un conjunto completo de pasos experimentales para determinar la potencia de los antibióticos utilizando el método del disco experimental microbiano.
Preparación antes del experimento: 4 placas de Petri, 2 pipetas, 1 varilla de recubrimiento, envolver las placas de Petri para esterilizarlas y tomar una cierta cantidad de agua destilada para esterilizarlas y obtener agua estéril.
1. Preparar medio de cultivo agar nutritivo: Pesar 9,6g de agar nutritivo, agregar 300ml de agua destilada, calentar y hervir, luego introducir el medio de cultivo en un matraz Erlenmeyer, luego envolver y esterilizar (121°C, 20min).
p>2. Vierta las placas: En un ambiente estéril, vierta el medio de cultivo anterior en 4 placas y numérelas 1, 2, 3, 4.
3. Suspensión bacteriana: Use una pipeta estéril de 5 ml en operación aséptica para extraer 3 ml de agua esterilizada en la pendiente del cultivo bacteriano, raspe suavemente el césped bacteriano con un asa de inoculación, tritúrelo, inserte un tapón de algodón y agite por un momento.
4. Diluya los antibióticos en soluciones de gradiente con cuatro diluciones diferentes: 10-3, 10-4, 10-5 y 10-6.
5. Tome unos cuantos papeles de filtro redondos con un diámetro de 1 cm y tome 4 Coloque cada papel de filtro redondo en una solución antibiótica 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 y déjelo en remojo por un tiempo.
6. Después de la placa solidifica, inocular y tomar 0,2ml de bacteria de cada una. Vierta la suspensión en la placa y extiéndala uniformemente con una varilla de recubrimiento.
7. Poner 4 placas inoculadas N°1, 2, 3 y 4 y remójelos en 10-3, 10-4, 10-5, 10-6 trozos de papel de filtro en solución antibiótica, y tenga en cuenta que la distancia entre cada trozo de papel debe ser grande.
8. Cultivo, colocar en incubadora a 37°C durante 24 horas.
9. Observar, medir y registrar los datos, observar las zonas de inhibición transparentes alrededor del papel de filtro de antibióticos, medir los tamaños de 16 zonas de inhibición y calcular los tamaños de las zonas de inhibición de los papeles de filtro de antibióticos con diferentes concentraciones.