Cómo empaquetar la columna de resina macroporosa D101
3． Método de operación [1～3]:
3.1. Embalaje de la columna: Remojar la resina de adsorción macroporosa D101 en acetona durante la noche (aproximadamente de 15 a 18 horas), refluir en un baño de agua durante 8 horas, filtrar (o filtración por succión), lavar con agua hasta obtener la solución: agua (1:2). no produce turbidez, sumérjalo en agua, luego empaquete la columna y agregue una pequeña cantidad de alúmina en la parte superior de la columna para hacer una columna de pretratamiento para su uso posterior.
3.2. Pretratamiento de la muestra: extraiga con precisión 5 ml de muestra (la muestra sólida se convierte en una solución de concentración considerable), agréguela a la columna de cromatografía de resina macroporosa D101 procesada y eluya con 100 ml de agua (use 300 ml de agua para muestras que contengan sacarosa). Desechar el líquido de lavado. Ir (caudal 1,5 ml/min). Luego use 30 ml de etanol absoluto para eluir en lotes al caudal original, recoja el eluido, evapore hasta sequedad, disuelva el residuo con etanol absoluto, transfiera cuantitativamente a un matraz volumétrico de 5 ml, diluya hasta la marca y utilícelo como la solución de prueba.
3.3. Preparación de la curva estándar: absorba con precisión 0, 20, 40, 60, 80 μl de solución estándar de saponina de Gynostemma pentaphyllum en un tubo de ensayo de 10 ml con tapón, evapore el disolvente en un baño de agua y agregue con precisión 0,5 ml de 5-vainillina. Solución de ácido acético glacial y 1,5 ml de ácido perclórico, mezclar bien. Calentar en un baño de agua a 60°C durante 15 a 20 minutos, enfriar en un baño de agua con hielo, agregar 5,0 ml de ácido acético glacial, agitar bien, utilizar el reactivo correspondiente como blanco y medir la absorbancia colorimétricamente a 545 nm.
3.4. Medición de la muestra: extraiga con precisión 100 μl de la solución de prueba, colóquela en el tubo de ensayo y presione 3.3. Lleve a cabo el método siguiente, mida la absorbancia y lea el peso de saponina de Gynostemma pentaphyllum en la solución de prueba a partir de la curva estándar.