¿Cuáles son las mejores condiciones para hacer jugo?

Diferentes frutas tienen diferentes condiciones óptimas. Si es para experimentos biológicos, debes agregar (pectinasa) lentamente y registrarlo en cualquier momento. Diseño experimental e implementación de "El papel de la pectinasa en la producción de jugo" [Traducido] 2009-03-21 21:35 1. Introducción En el procesamiento de jugo, la pectina no solo afectará el rendimiento del jugo, sino que también lo volverá turbio. Pectinasa es el nombre general de una clase de enzimas que descomponen la pectina. Puede hacer que sea más fácil exprimir el jugo y el jugo resultante será más claro. "El papel de la pectinasa en la producción de jugo" es el primer tema del Tema 4 "Investigación y aplicación de enzimas" del libro de texto experimental estándar "Práctica de biotecnología" (Optativa 1) para cursos generales de secundaria publicado por People's Education Press. requiere que los estudiantes puedan diseñar experimentos Explore los efectos de la temperatura y el pH sobre la actividad de la pectinasa y la cantidad óptima de pectinasa. Este contenido está estrechamente relacionado con la vida diaria de los estudiantes y se basa en el curso obligatorio "Exploración de las condiciones que afectan las enzimas". Actividad", por lo que es muy importante para los estudiantes. No es difícil de decir y es adecuado para operaciones prácticas. Sin embargo, el tema se centra más en el diseño de planes experimentales, que considera relativamente muchas variables, y también implica el diseño de gradientes de variables experimentales. Para obtener resultados ideales, se deben realizar experimentos y exploraciones repetidas. Durante el proceso de investigación, los estudiantes discutieron e implementaron los diseños y planes experimentales en los libros de texto y materiales de referencia, y plantearon diferentes preguntas y medidas de mejora. El autor seleccionó un caso más razonable, que se resume a continuación solo como referencia. 2. Materiales experimentales y métodos experimentales 2.1 Materiales experimentales Este experimento utiliza manzanas como materiales experimentales, que se exprimen en jugo antes de su uso; la pectinasa utilizada en el experimento se compró de Shanghai Lanji Biotechnology Co., Ltd. y se mezcló en una solución. con una fracción de masa de 2 antes de su uso. 2.2 Método experimental 2.2.1 Diseño experimental general

Figura 1 Plan de diseño experimental 2.2.2 Método de preparación del jugo Seleccione una manzana de tamaño mediano (aproximadamente 200 g), lávela, no la pele y córtela en trozos Trozos pequeños, poner en un exprimidor, agregar unos 200 ml de agua, exprimir durante 2 minutos para hacer puré de manzana. Mide un cierto volumen de puré de manzana, procésalo en diferentes condiciones y luego fíltralo con papel de filtro para obtener el jugo. 2.2.3 Indicadores de detección de la actividad de la pectinasa La pectinasa puede descomponer la pectina en sustancias moleculares pequeñas, que pueden pasar a través del papel de filtro. El volumen de jugo de manzana refleja la capacidad de la pectinasa para catalizar la descomposición de la pectina. Se midió el volumen de jugo de manzana filtrado como indicador de la actividad pectinasa. 2.2.4 Determine la cantidad óptima de pectinasa. Tome cinco tubos de ensayo y agregue 10 ml de puré de manzana a cada uno después de la numeración. Agregue agua, 0,5 ml, 1 ml, 2 ml y 4 ml2 de solución de pectinasa en secuencia. cada tubo de ensayo El volumen final es de 14 mL La reacción se lleva a cabo a temperatura ambiente durante un tiempo suficiente. Filtrar durante 15 minutos. Medir el volumen del jugo de manzana filtrado para determinar la cantidad óptima de pectinasa. 2.2.5 Determine el tiempo de acción de la pectinasa. Tome seis tubos de ensayo, agregue 10 ml de puré de manzana a cada uno después de numerarlos, agregue 1 ml de agua a uno como control en blanco, agregue 1 ml2 de solución de pectinasa a cada uno de los otros cinco y agregue. enzima a los cinco tubos de ensayo. Tratar a temperatura ambiente durante 1 min, 5 min, 10 min, 15 min y 20 min en secuencia. Después del tratamiento, utilice un baño de agua hirviendo para inactivar la enzima, filtre durante 15 minutos, mida el volumen de jugo de manzana filtrado y determine el tiempo de acción de la pectinasa. 2.2.6 Explore los efectos de diferentes temperaturas sobre la actividad de la pectinasa. Establezca el gradiente de temperatura: 10°C, 20°C, 30°C, 40°C, 50°C, 60°C, 70°C. y agregue 10 ml de manzanas a cada una después de la numeración. Haga puré, tome otros 7 tubos de ensayo, agregue 1 ml de solución de pectinasa a cada uno después de la numeración, primero coloque el puré de manzana y la solución de pectinasa a 10 ℃, 20 ℃, 30 ℃, 40 ℃, 50 ℃. 60 ℃, 70 ℃ respectivamente. Aislar en un baño de agua durante 10 minutos, luego mezclar el puré de manzana y la solución de pectinasa tratada a la misma temperatura e incubar a la temperatura correspondiente durante otros 5 minutos. Después del tratamiento, usar un baño de agua hirviendo para inactivar. la enzima, filtrar durante 15 minutos y medir la cantidad de volumen de jugo de manzana filtrado para determinar el efecto de diferentes temperaturas sobre la actividad de la pectinasa.

Si el laboratorio no cuenta con un baño de agua a temperatura constante, puede agregar diferentes proporciones de agua fría y agua caliente al vaso grande del baño de agua, y usar un termómetro para controlar la temperatura del baño de agua (agregue una cantidad adecuada de agua caliente de vez en cuando para mantener la temperatura). Cuando la temperatura ambiente es superior a 10 °C, puede utilizar cubitos de hielo o El compartimento de almacenamiento en frío del frigorífico se utiliza para controlar la temperatura del baño de agua de 10 °C. 2.2.7 Explore el efecto de diferentes valores de pH sobre la actividad de la pectinasa. Establezca el gradiente del valor de pH: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9. Tome 8 tubos de ensayo y agregue 10 ml de puré de manzana a cada uno. después de la numeración Tome 8 tubos de ensayo, agregue 1 ml2 de solución de pectinasa a cada uno. Después de la numeración, use una solución de HCl de 0,1 mol/L y una solución de NaOH con una fracción de masa de 1 para ajustar los valores de pH del puré de manzana y la solución de pectinasa. : 2, 3, Hay ocho gradientes de valor de pH, como 4, 5, 6, 7, 8 y 9. Utilice papel de prueba de pH o un medidor de pH para determinar el valor de pH. Luego mezcle puré de manzana y solución de pectinasa con el mismo pH. valor para obtener ocho gradientes de valor de pH diferentes. Para el sistema de reacción, use agua destilada para ajustar los volúmenes de las soluciones en los ocho tubos de ensayo al mismo volumen (el volumen total de la solución de reacción en este experimento es 16 ml), mantenga. Déjelo a temperatura ambiente durante 5 minutos, use un baño de agua hirviendo para inactivar la enzima después del tratamiento, filtre durante 15 minutos y mida el filtrado. Se determinó el volumen de jugo de manzana para determinar el efecto de diferentes valores de pH sobre la actividad de la pectinasa. . 3. Resultados experimentales 3.1 Se necesita aproximadamente 1 ml de solución de 2 pectinasa para procesar completamente 10 ml de puré de manzana. Configure un gradiente de volumen de 2 soluciones de pectinasa para catalizar el mismo volumen de puré de manzana (10 ml) respectivamente. Después de la catálisis, filtre. y obtener el volumen de jugo de manzana que se muestra en la Tabla I. Tabla Ⅰ Efecto de la cantidad de enzima en el volumen de filtración de jugo de manzana Solución de pectinasa del tubo de ensayo número 123452 00,5 ml 1 ml 2 ml 4 ml Volumen de jugo de manzana filtrado 5,4 ml 8,5 ml 9,3 ml 9,5 ml 9,5 ml Claridad del jugo de manzana filtrado Turbidez, clarificación. , aclaración, aclaración Se puede observar en la Tabla I y la Figura 2 (A) que cuando se tratan 10 mL de puré de manzana con diferentes cantidades de pectinasa a temperatura ambiente durante un tiempo suficientemente largo, en 1 a 4 tubos de ensayo, como el. La cantidad de pectinasa aumenta, el volumen del jugo de manzana obtenido aumentó en consecuencia, pero cuando la solución de pectinasa de 2 alcanzó 1 ml y la cantidad de enzima continuó aumentando, el volumen del jugo de manzana obtenido casi ya no aumentó, lo que indica que el sustrato se había agotado, mientras procesaba 10 mL de puré de manzana. La cantidad óptima de solución de pectinasa debe ser aproximadamente 1mL. 3.2 A temperatura ambiente, solo se necesitan de 5 a 10 minutos para que 1 ml2 de solución de pectinasa procese completamente 10 ml de puré de manzana. Tome 1 ml2 de solución de pectinasa para catalizar el mismo volumen de puré de manzana (10 ml) y trátelo. diferentes tiempos. El volumen de jugo de manzana obtenido es Clarity se muestra en la siguiente tabla. Tabla II. Efecto del tiempo de acción de la enzima en el tubo de ensayo de filtración de jugo de manzana número 123456 Tiempo de acción de la pectinasa 01min5min10min15min20min Volumen de jugo de manzana filtrado 4,5 ml 5,9 ml 7,8 ml 8,0 ml 8,0 ml 8,1 ml manzana filtrada La claridad del jugo es turbia , claro, claro, claro, claro y claro Se puede observar en la Tabla II y la Figura 2 (B) que en 1 a 4 tubos de ensayo, a medida que aumenta el tiempo de acción de la pectinasa, aumenta el volumen del jugo de manzana obtenido, pero cuando. Después de aumentar el tiempo de acción de la enzima a 10 minutos y continuar aumentando el tiempo de acción de la enzima, el volumen del jugo de manzana obtenido casi ya no aumenta, lo que indica que el sustrato se ha agotado cuando el tiempo de acción de la enzima es de 5 minutos. (tubo de ensayo 3), el volumen de jugo de manzana casi alcanza el valor máximo, por lo que se necesitan entre 5 y 10 minutos para que 1 ml2 de solución de pectinasa procese completamente 10 ml de puré de manzana.