¿Cuál es el método de conteo para la detección de muestras de cantidad de levadura?
Método de conteo con hemocitómetro (Curso Obligatorio 3 de People's Education Press, página 68)
(1) Utilice un hemocitómetro para contar el número de levaduras en la suspensión de levadura.
(2) El propósito de la dilución de la muestra es facilitar el recuento de la suspensión de levadura. Es apropiado contener de 4 a 5 células de levadura en cada cuadrado pequeño. Generalmente, una dilución de 10 veces es suficiente.
(3) Limpie el hemocitómetro con papel para lentes y cubra la cámara de conteo central con un portaobjetos de vidrio grueso especial.
(4) Tome la suspensión de levadura diluida y aspírela con una pipeta Coloque una gota en el borde del cubreobjetos para permitir que el líquido bacteriano se filtre lentamente. Utilice papel absorbente para absorber el exceso de líquido bacteriano y espere un momento para permitir que toda la levadura se asiente en la cámara de conteo del hemocitómetro.
(5) Conteo Si utiliza una cámara de conteo con una especificación de 16 × 25 rejillas, tome la posición diagonal y tome el número de levaduras en las 4 rejillas centrales superior izquierda, superior derecha, inferior izquierda y inferior derecha (es decir, 100 cuadrículas pequeñas). Si la especificación es 25. Para un tablero de conteo con cuadrícula × 16 cuadrículas, además de tomar las 4 direcciones diagonales, también necesita contar el número de levaduras en una cuadrícula intermedia (es decir, 80 cuadrados pequeños) en el centro. .?
(6 ) Cuando encuentre células de levadura ubicadas en líneas de cuadrícula grandes, generalmente solo cuente las células de levadura en las líneas superior y derecha de la cuadrícula grande (o solo cuente las células de levadura en las líneas inferior e izquierda) .
(7) Cuente cada muestra tres veces, tome el valor promedio y calcule el número de levaduras contenidas en 1 ml de solución bacteriana según la siguiente fórmula.
3. fórmula
(1) Fórmula de cálculo para un hemocitómetro de 16 células × 25 células:
Número de células de levadura/ml=Número de células de levadura en 100 células/100×400× 104×factor de dilución
(2) Fórmula de cálculo para hemocitómetro de 25 células x 16 células:
Número de células de levadura/ml=número de células de levadura en 80 células/80×400× 104×factor de dilución
La levadura (saccharomyce) es una célula receptora eucariota comúnmente utilizada en experimentos de clonación de genes. Cultivar levadura es tan conveniente como cultivar Escherichia coli. También existen muchos tipos de vectores de clonación de levaduras. La levadura también tiene plásmidos. Este plásmido de 2 pm de largo se llama plásmido de 2 µm, de aproximadamente 6300 pb. Este plásmido existe fuera del cromosoma en el núcleo al menos durante un período de tiempo. Utilizando el plásmido 2pm y el plásmido de E. coli, se puede construir un plásmido lanzadera que pueda desplazarse entre bacterias y células de levadura. Sobre esta base se construyen vectores de clonación de levaduras. ?
Las levaduras son algunos hongos unicelulares y no son unidades de clasificación filogenética. Un pequeño microorganismo unicelular invisible a simple vista que puede fermentar el azúcar en alcohol y dióxido de carbono. Se distribuye por toda la naturaleza. Es un microorganismo anaeróbico facultativo típico que puede sobrevivir tanto en condiciones aeróbicas como anaeróbicas. agente.