La sal más utilizada para preparar células competentes es
La sal más utilizada para preparar células competentes es el cloruro cálcico.
Las células competentes son células especialmente tratadas que pueden aceptar ADN exógeno y se utilizan a menudo en la clonación de genes y la investigación transgénica. El cloruro de calcio desempeña un papel importante en la preparación de células competentes. Por ejemplo, durante la preparación de células competentes, las células necesitan experimentar un breve entorno artificial con alto contenido de calcio. El cloruro de calcio, como proveedor de iones de calcio en alta concentración, puede inducir la agregación del ADN intracelular y formar un estado receptivo al ADN exógeno.
El uso de cloruro de calcio también puede aumentar la permeabilidad de la membrana celular, facilitando la entrada de ADN extraño al interior de la célula. Este efecto de aumentar la permeabilidad de la membrana celular facilita que el ADN exógeno se una a los componentes intracelulares, mejorando así la eficiencia de la clonación de genes y la investigación transgénica.
El cloruro de calcio también puede ayudar a la fusión del ADN exógeno y los componentes intracelulares aumentando la permeabilidad de las membranas celulares. Este proceso de fusión es uno de los pasos clave para lograr la transferencia genética, que permite que el ADN extraño se integre de manera estable en el ADN cromosómico de la célula receptora.
Sal para la preparación de células competentes:
1. El sulfato de calcio juega un doble papel en la preparación de células competentes. En primer lugar, es un agente precipitante de uso común que puede precipitar el ADN en las células, haciendo que el ADN se junte y forme un estado más receptivo al ADN extraño. Este proceso de agregación no sólo beneficia la eficiencia de transformación de la célula, sino que también reduce la toxicidad celular, dejando las células en un estado más saludable y energético.
En segundo lugar, el sulfato de calcio también puede aumentar la permeabilidad de las membranas celulares y promover la absorción de ADN exógeno. En el proceso de preparación de células competentes, agregar sulfato de calcio puede mejorar efectivamente la eficiencia de transformación de las células y proporcionar un mejor portador celular para la clonación de genes y la investigación transgénica.
2. El fosfato cálcico también es una sal comúnmente utilizada en la preparación de células competentes. Puede combinarse con el ADN para formar un complejo de fosfato cálcico-ADN, que protege el ADN de la degradación de las nucleasas. Al mismo tiempo, el fosfato de calcio también puede aumentar la permeabilidad de las membranas celulares, promover la absorción de ADN exógeno y mejorar aún más la eficiencia de transformación de las células. Al preparar células competentes, el fosfato cálcico se utiliza a menudo junto con el cloruro cálcico para formar un complejo de fosfato cálcico-ADN-cloruro de calcio, que mejora aún más la capacidad de transformación de las células.
3. El nitrato de calcio puede promover la agregación del ADN y aumentar la permeabilidad de la membrana celular en la preparación de células competentes. Los iones nitrato pueden interactuar con los grupos fosfato en el ADN para promover la agregación del ADN, haciendo que el ADN de las células alcance un estado receptivo al ADN extraño. Al mismo tiempo, el nitrato de calcio también puede aumentar la permeabilidad de las membranas celulares y promover la absorción de ADN exógeno. En el proceso de preparación de células competentes, se puede utilizar nitrato de calcio como agente auxiliar para mejorar aún más la eficiencia de la transformación celular y la clonación de genes.