El proceso de búsqueda de genes de anticongelantes animales
1. Buscar mutantes naturales de la especie resistentes o no resistentes al frío (si la especie es fácil de mutar artificialmente, también se puede utilizar la mutagénesis artificial). ), y extrae dos ARNm de células animales, observa las diferencias en el perfil de expresión génica entre individuos tolerantes o no tolerantes al frío e individuos normales.
Ahora se utiliza habitualmente un enfoque perezoso. El genoma de la célula animal se extrae y se corta en varios fragmentos, y luego el gen indicador se liga para preparar un plásmido de expresión y se transfiere a la célula animal. Luego utilice el método de inducción a baja temperatura. Si un gen indicador se expresa en células y se demuestra que se puede inducir la expresión de una secuencia de ADN ligada al gen indicador a bajas temperaturas, el gen puede ser el promotor de un gen anticongelante.