Pruebas médicas, ¿para qué se utilizan APTT, T T y PT?
El paquete de funciones de coagulación incluye más que PT, TT, APTT y FIB. Algunos hospitales grandes también añaden un índice de sensibilidad internacional (ISI) para garantizar la estandarización de PT. Hay muchos métodos de medición: método manual, semiautomático, completamente automático. El método requerido debe ser consistente con las condiciones actuales. Hay fabricantes especializados en reactivos, como Yazhong, Jinyu, hay muchos y existen sitios web oficiales. Baidu Qué se puede encontrar ~ Los siguientes son solo como referencia: Método recomendado de tiempo de protrombina (PT)
[Principio]
Divida la tromboplastina tisular (que contiene principalmente factor tisular y lípidos) y iones de calcio, se añaden al plasma anticoagulado con citrato, se incuban a 37°C y se mide el tiempo de coagulación del plasma, que es PT. La PT se utiliza principalmente para detectar inhibidores de los factores VII, II, V, X y factores relacionados del sistema de coagulación exógeno.
[Recolección y procesamiento de muestras]
1. Recolección de muestras: utilice una jeringa de silicona o plástico para extraer sangre venosa en ayunas y agregue cidra que contenga 0,109 mol/l en una proporción de 9. :1 Coloque el anticoagulante ácido de sodio en un tubo de ensayo siliconado o de plástico y mezcle suavemente.
2. Procesamiento de la muestra: Centrifugar a 2000-2500g durante 15 minutos para separar el plasma pobre en plaquetas y completar la prueba en 24 horas.
3. Plasma de control normal: Seleccionar más de 10 hombres y mujeres normales y sanos, con edades comprendidas entre 18 y 45 años. Sin embargo, no puede ser utilizado por mujeres que estén embarazadas, menstruando, amamantando o tomando anticonceptivos orales. El plasma recolectado debe liofilizarse o almacenarse a -80°C.
[Reactivo]
1. Anticoagulante: Solución de citrato de sodio 109 mmol/L (equivalente a 32 g/L de citrato de sodio que contiene dos moléculas de agua cristalina).
2. Reactivo de tromboplastina: Los productos disponibles comercialmente deben estar marcados con ISI, número de lote y fecha de caducidad. Los productos liofilizados deben reconstituirse con el diluyente tampón especificado según las instrucciones.
3. Solución de cloruro de calcio (CaCl2): 25 mmol/L. (En la actualidad, algunos reactivos comerciales tienen una solución mixta de tromboplastina y una solución de cloruro de calcio, y no es necesario preparar una solución adicional de CaCl2).
4. Sustancias de control de calidad: plasma de control normal y anormal.
5. El agua utilizada para preparar los reactivos debe cumplir con los estándares de agua pura de Grado 1.
[Instrumento]
1. Método manual: cronómetro, baño de agua a temperatura constante o bloque calefactor eléctrico mantenido a 37 ℃ ± 1 ℃. La profundidad del agua puede sumergir el tubo de ensayo por más de 3 cm y la superficie no tiene rayones en el tubo de hisopo de 10 × mm. Pipeta estándar de 0,1 ml. Cronómetro corregido.
2. Método del instrumento: opere varios medidores de coagulación automáticos o semiautomáticos estrictamente de acuerdo con las instrucciones.
[Pasos de operación]
1. Método manual
(1) La temperatura de medición es de 36,5 ~ 38,5 ℃. Los reactivos anteriores y el plasma analizado deben ser. precalentado a esta temperatura, pero el precalentamiento del reactivo de tromboplastina no debe exceder los 30 minutos, y el precalentamiento del plasma generalmente no debe exceder los 10 minutos.
(2) Todos los tubos de ensayo, inyectores de muestras y demás equipos que entran en contacto con el plasma son tubos de plástico o vidrio siliconado.
(3) Tomar 0,1 mL de plasma anticoagulante citratado y añadirlo a un tubo de ensayo pequeño: añadir 0,1 mL de reactivo de tromboplastina, mezclar bien y colocar en un baño de agua a 37°C. Luego agregue 0,1 ml de solución de CaCl2 de 25 mmol/L (también puede mezclar primero cantidades iguales de reactivo de tromboplastina y solución de CaCl2 y agregar 0,2 ml). Mezcle inmediatamente y ponga en marcha el cronómetro: el tubo de ensayo todavía está sumergido en el baño de agua. Cuando llegue a unos 10 segundos, sáquelo del baño de agua. Limpie rápidamente las gotas de agua fuera del tubo de ensayo con una gasa. tubo en un lugar brillante y observe si hay fugas en el estado de flujo. Tan pronto como se observe fibrina (y el flujo de líquido disminuirá), detenga el reloj inmediatamente y registre la hora. Se miden dos tubos cada vez y se reportan como el promedio. El pH de la mezcla final en esta prueba debe ser de 7,2 a 7,3. La mayoría de los reactivos de tromboplastina comerciales se preparan con soluciones que contienen tampón.
(4) Se deben realizar controles normales y anormales para cada lote al mismo tiempo, y el método debe ser exactamente el mismo que el de la muestra de prueba.
[Método de informe]
1. Informe en segundos (S) de PT (0,5 segundos más cercanos)
2. Informe en plasma del paciente (S)) Se informa la relación PT(S) (PRT)/control normal.
3. Al monitorear el tratamiento con anticoagulantes orales con warfarina, se debe informar el índice internacional normalizado (INR). La mayoría de los instrumentos automatizados pueden calcular automáticamente el INR basándose en el PTR y el ISI medidos del reactivo de tromboplastina. El método manual se puede calcular directamente con una calculadora de acuerdo con la siguiente fórmula:
Poller diseñó un nomograma simple. Después de obtener los valores de PTR e ISI, el valor de INR se puede encontrar directamente en el gráfico. muy conveniente y se ha introducido en China.
Las regulaciones ICSH ya no utilizan curvas de dilución ni informes de porcentaje (actividad).
[Valor de referencia]
Debido a diferentes instrumentos/reactivos, se obtendrán resultados diferentes, por lo que es difícil especificar de manera uniforme el valor de referencia. Cada laboratorio debe medir de forma independiente a un grupo de personas sanas y establecer valores de referencia en función de sus propios instrumentos, reactivos y otras condiciones.
Posteriormente se restablecerá al menos anualmente o cuando las condiciones cambien, con base en nuevas condiciones. Todas las condiciones para la medición del PT del valor de referencia deben ser las mismas que las de la medición del PT en plasma del paciente (incluida la extracción de sangre, los recipientes, los anticoagulantes, etc.). Los donantes de sangre sanos deben seleccionarse entre al menos 20 hombres de entre 18 y 55 años y mujeres que no estén embarazadas ni menstruando. No deben tomar medicamentos y extraer sangre en estado de calma y reposo para reducir las diferencias individuales (si es posible, un grupo de ancianos). las personas y los niños se pueden probar por separado). Al mismo tiempo, la extracción y medición de la sangre deben separarse varios días para reducir las diferencias diarias. Los resultados de la medición se procesan estadísticamente y se calcula la desviación estándar: se utilizan dos desviaciones estándar (2SD) o un límite de confianza del 95% como rango de referencia. Es necesario evaluar si tres desviaciones estándar son normales o anormales en función de la situación específica. Estadísticamente hablando, algunas de estas personas son normales. Utilizando los criterios anteriores, rara vez se pasará por alto a los pacientes (anomalías del PT).
3. Estandarización del tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA)
(1) Estandarización del tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA)
El TTPA es una prueba de detección para detectar Los defectos de los factores de coagulación y los inhibidores relacionados en el sistema de coagulación endógeno también son actualmente los principales medios para detectar factores de coagulación, terapia anticoagulante con heparina y sustancias anticoagulantes del lupus.
Al igual que con el ensayo PT, diferentes tromboplastinas parciales, diferentes activadores y diferentes tiempos de activación tienen sensibilidades muy diferentes a diversas deficiencias de factores de coagulación, a la heparina y a los anticoagulantes lúpicos. Por ejemplo, los diferentes activadores (caolín, tierra de diatomeas, ácido elágico) utilizados en los reactivos para detectar APTT tienen diferentes sensibilidades para detectar heparina, sustancias anticoagulantes lúpicas y factores VIII y IX.
Hasta la fecha, ICSH e ICTH aún no han elaborado un plan viable para estandarizar los métodos o reactivos de detección de APTT. Sólo NCCLS propuso un plan provisional numerado H29-T en 1992.
(2) Método recomendado para el tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPA)
[Principio]
Añadir un fosfolípido y un activador al plasma Después de la incubación, añadir la concentración adecuada de iones calcio. El tiempo (en segundos) que tarda en formarse el coágulo de fibrina es el TTPA. Este método se utiliza principalmente para detectar y determinar defectos en los factores de coagulación de la vía endógena, como los factores VII, XI, VIII, IX, calicreína (PK), cininógeno de alto peso molecular (HMWK) y fibrinógeno. También se utiliza para la determinación de inhibidores de los factores anteriores, el seguimiento del tratamiento con heparina y el examen de factores anticoagulantes lúpicos.
[Instrumento]
Los instrumentos y equipos utilizados en este experimento (incluida la extracción de sangre, los contenedores de almacenamiento de sangre, los dispositivos de muestreo y el procesamiento de muestras, etc.) y sus requisitos son completamente los mismos. como PT. Los instrumentos automatizados utilizados en PT también son adecuados para este experimento.
[Reactivo]
1. Reactivo de tromboplastina parcial: suministrado por productos comerciales. Generalmente, los activadores comúnmente utilizados se preparan junto con el activador en proporción (o por separado). Los activadores comúnmente utilizados son tierra de diatomeas (nombre comercial: Celite), arcilla blanca, partículas de sílice, ácido tánico (ácido elágico) u otros activadores disponibles. Agente, suministrado por la fábrica.
La combinación de reactivo/instrumento APTT debería ser capaz de producir resultados anormalmente prolongados en plasma con una actividad del factor VIII, IX o XI inferior a 0,3 μ/ml (o <30 %).
2. La solución de cloruro de calcio (25 mmol/L) y otros reactivos son los mismos que los utilizados en PT.
[Pasos de la operación]
1. La recolección, almacenamiento y transporte de muestras son los mismos que para la medición de PT. Tenga en cuenta que se deben utilizar dispositivos de extracción de sangre de plástico limpio o vidrio siliconado para recolectar y almacenar sangre.
2. La preparación de la muestra (plasma empobrecido en plaquetas) es la misma que la del PT. Tenga en cuenta que para el ensayo se debe utilizar plasma empobrecido en plaquetas.
3. La temperatura del baño de agua o de la placa eléctrica es de 37 ℃ ± 1 ℃. Compruebe siempre si es correcta.
4. Tiempo de activación del contacto: El tiempo para agregar el activador para activar el factor XII debe ser consistente. Las regulaciones de cada fabricante de instrumentos y reactivos pueden ser diferentes, por lo que se deben seguir estrictamente las instrucciones. Cuando opere manualmente, use un cronómetro o dispositivo de cronometraje similar.
5. Operación: Mezcle una parte de reactivo APTT precalentado (no más de 30 minutos) con una parte de plasma de prueba precalentado (no más de 10 minutos), inicie el cronómetro inmediatamente; la activación de contacto especificada. Al final del tiempo, añadir una porción de solución de CaCl2 precalentada a 37°C, mezclar bien y poner en marcha el cronómetro al mismo tiempo. Cuando se produzca la coagulación del plasma, detenga el reloj y registre el tiempo de coagulación del plasma (en segundos). Durante la medición manual, se deben medir dos tubos al mismo tiempo y reportarlos como el promedio. Algunos coagulómetros automáticos o semiautomáticos, cuya precisión ha mejorado considerablemente, sólo pueden medirse una vez si se dispone de normas de control de calidad adecuadas. El plasma de control normal y anormal debe medirse simultáneamente.
Lo sentimos, TT no pudo encontrarlo, pero después de contactar al fabricante autorizado, probablemente no tengas que buscarlo tú mismo~