Principio y aplicación de qPCR (principio y aplicación de qPCR ppt)
Principio de qPCR: Detectar productos mediante electroforesis en gel, electroforesis capilar y otros métodos. qPCR se utiliza en universidades e institutos de investigación, CDC, oficinas de inspección y cuarentena, estaciones veterinarias, empresas de alimentos y fábricas de lácteos, etc.
1.qPCR es un método que utiliza químicos fluorescentes para medir la cantidad total de producto después de cada ciclo de reacción en cadena de la polimerasa en una reacción de amplificación de ADN. El ADN es un polímero macromolecular compuesto de desoxirribonucleótidos. Los desoxirribonucleótidos están compuestos de bases, azúcar desoxirribosa y fosfato. Hay 4 tipos de bases: adenina, guanina, timina y citosina.
2. La PCR en tiempo real utiliza señales de fluorescencia para detectar el proceso de PCR en tiempo real durante el proceso de amplificación de la PCR. La PCR con transcripción inversa, o PCR con transcripción inversa, es una variación ampliamente utilizada de la reacción en cadena de la polimerasa. En RT-PCR, una cadena de ARN se transcribe inversamente en ADN complementario, que luego se utiliza como plantilla para la replicación del ADN mediante PCR. La transcripción de una sola hebra de ARN en ADN complementario se denomina "transcripción inversa" y la completa la ADN polimerasa dependiente de ARN.
3. Dado que existe una relación lineal entre el valor Ct de la plantilla y el número de copias inicial de la plantilla durante la fase exponencial de la amplificación por PCR, se convierte en la base para la cuantificación. La PCR digital es una PCR digital, que es una tecnología cuantitativa absoluta para moléculas de ácido nucleico. En comparación con la qPCR, la PCR digital le permite generar directamente el número de moléculas de ADN, que es una cuantificación absoluta de la muestra inicial.