Requisitos de la sala de pruebas microbianas de fábrica de nivel 100.000 GMP |?

Procedimientos estandarizados y especificaciones de aceptación de salas estériles

1. Propósito

Este procedimiento tiene como objetivo proporcionar un procedimiento estandarizado para operaciones asépticas y protección de salas estériles.

2. Ámbito de aplicación

Laboratorio de pruebas microbiológicas

3. Persona Responsable: Supervisor y Probador de Control de Calidad

4. Definición Ninguna

5. Precauciones de seguridad

Operación estrictamente aséptica para evitar la contaminación microbiana; los operadores deben apagar la lámpara UV antes de ingresar a la sala estéril.

6. Normas de construcción

1. La sala estéril debe estar equipada con un quirófano estéril y una sala intermedia. La limpieza del quirófano estéril debe alcanzar el nivel 10000. La temperatura interior debe mantenerse entre 20 y 24 °C. C y la humedad debe mantenerse entre 45 y 60ºC. La limpieza del banco ultralimpio debe alcanzar el nivel 100.

2. La sala estéril debe mantenerse limpia y está estrictamente prohibido amontonar escombros para evitar la contaminación.

3. Prevenir estrictamente la contaminación de todos los equipos de esterilización y medios de cultivo que hayan sido contaminados deben dejar de utilizarlos.

4. La sala estéril debe estar equipada con desinfectantes de concentración de trabajo, como solución de cresol al 5%, alcohol al 70%, solución de clormetionina al 0,1%, etc.

5. La sala estéril debe esterilizarse y limpiarse periódicamente con un desinfectante adecuado para garantizar que la limpieza de la sala estéril cumpla con los requisitos.

6. Todos los instrumentos, instrumentos, platos y otros elementos que deban llevarse a la sala estéril para su uso deben envolverse herméticamente y esterilizarse mediante los métodos adecuados.

7. Antes de ingresar a la sala estéril, el personal debe lavarse las manos con jabón o desinfectante y luego ponerse ropa, zapatos, gorros, máscaras y guantes de trabajo especiales en la sala de amortiguación (o limpiarse las manos nuevamente). con etanol al 70%) ) antes de ingresar a la sala estéril para su operación.

8. Antes de utilizar la sala estéril, la lámpara ultravioleta de la sala estéril debe estar encendida para irradiación y esterilización durante más de 30 minutos, y el banco limpio debe estar encendido para soplar. Una vez completada la operación, la habitación estéril debe limpiarse a tiempo y luego esterilizarse con luz ultravioleta durante 20 minutos.

9.Antes de la inspección, el embalaje exterior de la muestra de prueba debe mantenerse intacto y no debe abrirse para evitar la contaminación. Antes del examen, desinfecte la superficie exterior con un algodón con alcohol al 70%.

10. Durante cada operación se debe realizar un control negativo para comprobar la fiabilidad del funcionamiento aséptico.

11. Al chupar líquido bacteriano, debes utilizar una bola de succión para chuparlo. No toques la pajita directamente con la boca.

12. La aguja de inoculación debe esterilizarse mediante llama antes y después de cada uso. Después de enfriarse, se puede inocular el cultivo.

13. Las pajitas, tubos de ensayo, placas de Petri y otros utensilios que contengan líquido bacteriano deben remojarse en un balde de esterilización que contenga una solución de Lysol 5 para su desinfección, y sacarse y enjuagarse después de 24 horas.

14. Si se derrama líquido bacteriano sobre la mesa o el suelo, se debe verter inmediatamente una solución de ácido carbólico 5 o Lysol al 3% sobre la zona contaminada durante al menos 30 minutos antes del tratamiento. Cuando la ropa de trabajo y los sombreros están contaminados con líquido bacteriano, se deben quitar inmediatamente y lavar después de la esterilización con vapor a alta presión.

15. Todos los artículos que contengan bacterias vivas deben desinfectarse antes de enjuagarse bajo el grifo. Está estrictamente prohibido contaminar el alcantarillado.

16. Se debe comprobar mensualmente el número de colonias bacterianas en la sala estéril. Con el banco de trabajo ultralimpio abierto, tome varias placas de Petri estériles con un diámetro interior de 90 mm e inyecte asépticamente unos 15 ml de medio de cultivo de agar nutritivo que se haya derretido y enfriado a unos 45 °C. Después de la solidificación, colóquelo boca arriba. abajo a 30 a 35 Incubar durante 48 horas en una incubadora ℃ Después de comprobar la esterilidad, tomar de 3 a 5 placas y colocarlas a la izquierda, media y derecha de la posición de trabajo. Después de abrir la tapa y exponerlas durante 30 minutos, colocar. Colóquelos boca abajo en una incubadora de 30 a 35°C durante 48 horas y sáquelos. El número promedio de bacterias diversas en la placa en un área limpia Clase 100 no deberá exceder 1 colonia, y el número promedio en una sala limpia Clase 10000 no deberá exceder 3 colonias. Si se excede el límite, la sala estéril debe desinfectarse completamente hasta que las inspecciones repetidas cumplan con los requisitos.

Siete. Consulte el capítulo "Métodos de inspección higiénica de medicamentos" "Procedimientos operativos estándar chinos para la inspección de medicamentos" (Método de inspección de esterilidad) de la República Popular China y la Norma Nacional de la Industria Farmacéutica YY/T0188.6-1995 "Procedimientos operativos de inspección de medicamentos"

8. Departamentos aplicables

Departamento de Gestión de Calidad

Orientación técnica sobre salas limpias

Después de obtener un ambiente estéril y materiales esterilizados, también debemos mantener la esterilidad. Solo en este estado podemos estudie un determinado microorganismo conocido o utilice sus funciones; de lo contrario, se pueden mezclar fácilmente varios microorganismos del exterior. El fenómeno de la mezcla de microorganismos irrelevantes del exterior se denomina bacteria contaminante en microbiología. Prevenir la contaminación es una técnica crítica en el trabajo microbiológico. La esterilización completa, por un lado, y la prevención de la contaminación, por otro, son dos aspectos de la técnica aséptica. Además, debemos evitar que los microorganismos en estudio, especialmente los microorganismos patógenos o los microorganismos genéticamente modificados que no existen en la naturaleza, escapen de nuestros contenedores experimentales al medio externo. Para estos fines, en microbiología existen muchas medidas.

La sala estéril suele ser una pequeña sala especialmente habilitada en el laboratorio de microbiología. Fabricado en chapa de acero color y cristal templado. El área no debe ser demasiado grande, entre 5 y 20 metros cuadrados, y la altura debe ser de unos 2,5 metros. Se debe instalar una sala de amortiguación fuera de la sala estéril. La puerta de la sala de amortiguación y la puerta de la sala estéril no deben mirar en la misma dirección para evitar que el flujo de aire introduzca bacterias diversas. Tanto la sala estéril como la sala intermedia deben ser herméticas. Los equipos de ventilación interior deben contar con dispositivos de filtración de aire. El suelo y las paredes de la sala estéril deben ser lisos, difíciles de albergar suciedad y fáciles de limpiar. La superficie de trabajo debe estar nivelada. Tanto la sala estéril como la sala intermedia están equipadas con lámparas ultravioleta, y la lámpara ultravioleta en la sala estéril está a 1 metro de la superficie de trabajo. El personal que ingresa a la sala estéril debe usar ropa y gorros esterilizados.

Actualmente, las salas estériles se encuentran principalmente en las fábricas de microbiología, mientras que los laboratorios generales utilizan mesas limpias. La función principal del banco de limpieza es utilizar el dispositivo de flujo de aire laminar para eliminar diversos polvos diminutos, incluidos los microorganismos, de la superficie de trabajo. El dispositivo eléctrico permite que el aire pase a través del filtro de alta eficiencia y luego ingrese a la superficie de trabajo, de modo que la superficie de trabajo se mantenga siempre bajo el control del flujo de aire estéril. Además, hay una cortina de aire de alta velocidad en el lado cercano al exterior para evitar la entrada de aire bacteriano externo.

La tecnología de operación aséptica actualmente no solo juega un papel fundamental en la investigación y aplicación microbiológica, sino que también se utiliza ampliamente en muchas biotecnologías. Por ejemplo, tecnología transgénica, tecnología de anticuerpos monoclonales, etc.

El quirófano estéril debe tener un dispositivo de flujo de aire unidireccional con esterilización y filtración de aire, y operar una mesa de trabajo limpia con un nivel de limpieza de 100 o equivalente. La temperatura interior debe controlarse a 18-26. grados Celsius, y la humedad relativa debe controlarse entre 18 y 26 grados Celsius 45-65. La sala estéril debe tener buena iluminación, evitar la humedad y estar alejada de baños y áreas contaminadas. El área generalmente no supera los 10 metros cuadrados y no es inferior a 5 metros cuadrados. La altura no supera los 2,4 metros y consta de 1 o 2 salas de amortiguamiento y una sala de operaciones (las puertas de la sala de operaciones y de la sala de amortiguamiento no deben estar enfrentadas directamente entre sí).

Tabla de uso de sala limpia

Fecha de uso Diferencia de presión (Pa) Temperatura (℃) Humedad () Fuente de alimentación Firma