¿Cuál es el principio del experimento de Elisa?
El principio del experimento de Elisa es fijar una cierta concentración de antígeno o anticuerpo en la superficie de una microplaca de poliestireno mediante adsorción física, agregar la muestra a analizar e indirectamente reflejar el color de la etiqueta enzimática a través de la profundidad de la sustancia de prueba. La presencia o cantidad de antígeno o anticuerpo.
La tecnología ELISA, como una de las tecnologías de inmunomarcaje (incluida la tecnología de inmunofluorescencia, la tecnología de inmunoradiación, la tecnología de inmunoenzimas y la tecnología de oro inmunocoloidal), se ha utilizado ampliamente en investigaciones científicas y experimentos clínicos, y tiene las características de rapidez, Características cualitativas o cuantitativas o incluso de posicionamiento.
ELISA se puede utilizar para medir tanto antígenos como anticuerpos. Hay tres reactivos necesarios en este método de ensayo: antígeno o anticuerpo en fase sólida, antígeno o anticuerpo marcado con enzima y sustrato enzimático.
Se pueden diseñar varios tipos de métodos de prueba según la fuente de los reactivos, las características de la muestra y las condiciones de prueba.
Método de detección
1. Método sándwich de doble anticuerpo
Este método es adecuado para la determinación de antígenos macromoleculares con valencias bivalentes o más. no es adecuado para la determinación de antígenos semianticuerpos. Los antígenos y los antígenos monovalentes de molécula pequeña no pueden formar un sándwich de dos sitios.
2. Método de competición
Este método se utiliza generalmente para detectar sustancias de moléculas pequeñas con menos epítopos. Por supuesto, este método también se puede utilizar para detectar sustancias antigénicas de moléculas grandes o incluso anticuerpos. . Al detectar sustancias antigénicas macromoleculares, debido a la influencia del impedimento estérico, este método de detección no es tan sensible como el método sándwich de doble anticuerpo para detectar sustancias antigénicas macromoleculares.
3. Método indirecto para detectar anticuerpos
Este método puede utilizar un anticuerpo marcado con enzima para detectar varios anticuerpos correspondientes al antígeno siempre que se reemplacen diferentes antígenos en fase sólida. Se utiliza principalmente para la detección de patógenos y el diagnóstico de enfermedades infecciosas.
IV. Método sándwich de doble antígeno para detectar anticuerpos
Tanto el método sándwich de doble antígeno como el método indirecto pueden detectar anticuerpos.
5. Detección de anticuerpos mediante método de captura
Recubra el anticuerpo anti-IgM en la placa de micropocillos en fase sólida, bloquee los sitios no unidos con portadores de proteínas irrelevantes y luego agregue la muestra. se probará, luego agregue la sustancia antigénica, luego agregue el anticuerpo específico marcado con biotina y la estreptavidina marcada con HRP contra el antígeno, y la concentración se puede calcular después del desarrollo del color del sustrato TMB y la terminación de la reacción.
Referencia del contenido anterior: kit elisa - Enciclopedia Baidu