Cómo determinar el peso molecular de una determinada proteína utilizando el método sds-page
La forma de utilizar el método SDS-Page para determinar el peso molecular de una determinada proteína es la siguiente:
La definición de electroforesis: las partículas cargadas se mueven en la dirección opuesta a su dirección eléctrica. propiedades bajo la acción de un campo eléctrico. Clasificación de electroforesis: Separación por carga, separación por peso molecular, separación por punto isoeléctrico. Aplicaciones SDS-PAGE: medición de peso molecular; separación e identificación. Debido a que la proteína se extrae mediante métodos bioquímicos, ¿tiene carga la proteína? Es la proteína de la muestra mezclada.
El principio es que el enfoque isoeléctrico se utiliza en la primera dirección en función de la diferencia en la proteína PI. Durante la electroforesis, tanto los electrodos positivos como los negativos sufrirán reacciones de electrólisis y el fenómeno de moverse hacia el electrodo. la propiedad eléctrica opuesta se llama electroforesis. Bajo la influencia de un campo eléctrico externo, las partículas cargadas se moverán hacia el electrodo con la propiedad eléctrica opuesta. Este fenómeno se llama electroforesis.
La tecnología de electroforesis se puede utilizar para el análisis, separación y preparación de biomoléculas como aminoácidos, péptidos, proteínas y nucleótidos. La electroforesis de zonas es la separación de una mezcla de proteínas en varias zonas mediante electroforesis sobre un soporte. El fenómeno de la electroforesis en los coloides demuestra que las partículas de los coloides están cargadas. La naturaleza de las distintas partículas coloidales es diferente. Adsorben diferentes iones, por lo que tienen diferentes cargas.
Sobre un determinado soporte, en un electrolito portador uniforme, agregue la muestra en la posición media. Bajo la acción del campo eléctrico, los iones cargados positiva o negativamente en la muestra se mueven hacia el electrodo negativo o positivo. a diferentes velocidades. Muévase y sepárese en zonas separadas. Dependiendo de las propiedades físicas del soporte, la electroforesis de zona se puede dividir en electroforesis de membrana de papel y otras fibras, electroforesis en polvo, electroforesis en gel y electroforesis de seda.
Cuando una proteína se somete a electroforesis en un gel de poliacrilamida, su migración depende de factores como su carga, tamaño molecular y forma. Cuando se agrega el detergente aniónico dodecilsulfato de sodio (SDS) al sistema de poliacrilamida, la mayoría de las proteínas pueden unirse al SDS en una cierta proporción, es decir, cada gramo de proteína combinado con 1,4 g de complejos de SDS tendrá la misma densidad. carga negativa.