Red de conocimiento del abogados - Bufete de abogados - Principio del secuenciador de ADN

Principio del secuenciador de ADN

El analizador genético Abi prism 310 (es decir, el secuenciador de ADN) utiliza tecnología de electroforesis capilar en lugar de la electroforesis tradicional en placas de poliacrilamida, y utiliza el ddntp (método de terminador etiquetado) etiquetado con tinte fluorescente de cuatro colores patentado por la compañía, por lo que puede secuenciarse mediante una reacción de PCR con cebador único. , el producto de PCR generado es una mezcla de ADN monocatenario con cuatro tintes fluorescentes diferentes en el extremo 3', que se diferencian en 1 base. De esta manera, los productos de PCR de secuenciación de los cuatro tintes fluorescentes se pueden electroforetizar en el capilar, evitando la necesidad de carriles para nadar y El impacto de las diferencias de movilidad entre moléculas Debido a los diferentes tamaños moleculares, la movilidad en la electroforesis capilar también es diferente. Un detector de cámara CCD (dispositivo de carga acoplada) en la ventana del detector láser puede detectar moléculas fluorescentes una por una a medida que pasan a través de la ventana de lectura capilar. La fluorescencia excitada se segmenta mediante una rejilla para distinguir diferentes colores de fluorescencia que representan información diferente del sustrato, y las imágenes se sincronizan en una cámara CCD. El software de análisis puede convertir automáticamente diferentes fluorescencias en secuencias de ADN para lograr el propósito de la secuenciación del ADN. Los resultados del análisis se pueden generar en diversas formas, como patrones de electroforesis en gel, patrones de picos de absorción de fluorescencia o secuencias de disposición de bases.

Es un instrumento de precisión avanzado que utiliza control automático por ordenador, como llenado automático de gel, muestreo automático, recogida y análisis automático de datos, y medición de la secuencia de bases, tamaño y cuantificación de fragmentos de ADN. PE también ofrece polímeros en gel, incluidos geles de secuenciación de ADN (pop 6) y geles de escaneo genético (pop 4). Los tamaños de poro de estas partículas de gel son uniformes, lo que evita el impacto de condiciones de preparación de gel inconsistentes en la precisión de la secuenciación. Consiste principalmente en un dispositivo de electroforesis capilar, una computadora Macintosh, una impresora a color y accesorios de electroforesis. Las computadoras incluyen software para la recopilación de datos, el análisis y la operación de instrumentos. Utiliza el último detector de cámara CCD para acortar la secuenciación de ADN a 2,5 h, y el análisis del tamaño de los fragmentos de PCR y el análisis cuantitativo de 10 a 40 minutos.

Debido a que el instrumento tiene funciones de secuenciación de ADN, análisis del tamaño de fragmentos de PCR y análisis cuantitativo, puede realizar secuenciación de ADN, análisis de heterocigotos, análisis de polimorfismo de conformación monocatenario (sscp), análisis de secuencia de microsatélites y PCR de fragmentos largos. , rt-PCR (PCR cuantitativa) y otros análisis. Además de la secuenciación de ADN convencional, también puede realizar análisis de polimorfismo de un solo nucleótido (SNP), detección de mutaciones genéticas, comparación de HLA y medicina forense.