Las similitudes y diferencias entre IRMA y RIA.
Ambas son técnicas de radioinmunoensayo, pero son diferentes. Incluyen principalmente:
(1) Las etiquetas son antígenos marcados con radionúclidos en RIA y anticuerpos marcados con radionúclidos en IRMA. Existen diferentes tipos de antígenos y, dependiendo de sus estructuras químicas, se necesitan diferentes nucleidos y diferentes métodos para el etiquetado. Los anticuerpos son proteínas y favorecen el etiquetado con yodación. Los métodos de etiquetado para diferentes anticuerpos son básicamente los mismos. El anticuerpo marcado tiene una alta actividad específica, lo que mejora la sensibilidad del análisis.
(2) Velocidad de reacción La velocidad de reacción es directamente proporcional a la concentración del reactivo. En IRMA, el anticuerpo marcado es excesivo y no hay una reacción compleja de unión competitiva, por lo que la velocidad de reacción es más rápida que. RIA. En RIA, la cantidad de anticuerpo es mínima, por lo que se deben utilizar anticuerpos policlonales de alta afinidad. En IRMA, también se pueden obtener resultados satisfactorios utilizando anticuerpos monoclonales con menor afinidad.
(3) Principio de reacción RIA es una inhibición competitiva y la cantidad de radiactividad medida es inversamente proporcional al antígeno probado. IRMA es una unión no competitiva y la curva dosis-respuesta es una relación lineal positiva.
(4) Especificidad En el sitio IRMA, generalmente se usan anticuerpos monoclonales dirigidos a diferentes sitios, y la tasa de reacción cruzada es menor que la RIA que usa anticuerpos policlonales.
(5) La concentración de trabajo de la curva estándar de sensibilidad y rango de detección generalmente el rango de trabajo de RIA es de 2 a 3 órdenes de magnitud, mientras que RIMA puede alcanzar más de 3 órdenes de magnitud.
(6) Error de análisis Los anticuerpos y los antígenos marcados agregados en RIA son cuantitativos y el error de adición de la muestra puede afectar seriamente los resultados de la medición. Tanto los anticuerpos marcados como los de fase sólida en IRMA están en exceso durante la reacción, y solo el error de carga de la muestra que se analiza afectará los resultados del análisis. Por lo tanto, la variabilidad intraensayo e interensayo de IRMA es relativamente pequeña.
(7) Otros RIA pueden medir sustancias con pesos moleculares grandes y pequeños, mientras que IRMA de doble sitio solo puede detectar sustancias con más de dos epítopos antigénicos en la molécula.