¿Cuál es la tercera generación de tecnología de FIV?
La primera generación de "bebés probeta" debería llamarse fertilización in vitro y transferencia de embriones, y "bebés probeta" es sólo un nombre común.
La primera generación de fertilización in vitro se refiere a una tecnología de reproducción asistida que mezcla los óvulos y el esperma del paciente en una placa de Petri para fertilizar los óvulos y luego trasplanta los embriones producidos a partir de los óvulos fertilizados cultivados in vitro en el útero de la paciente.
La tecnología de segunda generación se utiliza desde 1996. Está dirigida a parejas cuyos maridos tienen oligospermia severa, astenozoospermia o falta de esperma y requieren una biopsia testicular para obtener esperma.
En comparación con la primera generación, la tecnología ha madurado mucho. El nombre correcto para la segunda generación del "bebé probeta" es inyección intracitoplasmática de espermatozoides. Se trata de una técnica precisa y delicada que requiere trabajar bajo un microscopio. El óvulo se fija con un fijador especial y luego se utiliza una aguja delgada para aspirar el esperma, que pasa a través de la zona de permeabilidad y la membrana del óvulo fuera del óvulo.
A partir del año 2000 se empezó a utilizar la tecnología de fecundación in vitro de tercera generación, que es adecuada para algunas parejas con enfermedades genéticas y anomalías cromosómicas. Como hemofilia, talasemia, etc. Esta tecnología es una opción.
Debido a que algunas enfermedades genéticas se localizan en los cromosomas sexuales, al mismo tiempo se puede identificar el sexo del embrión (XX, XY).
La tercera generación de FIV es la tecnología de cultivo de FIV más madura hasta la fecha. La tercera generación de "bebés probeta" en realidad se centra en el diagnóstico genético previo a la implantación. Al igual que los "bebés probeta" de primera y segunda generación, los embriones se obtienen mediante fertilización in vitro. Cuando el embrión se convierte en un embrión pequeño con 4-8 células, se extraen 1 o 2 células (comúnmente conocidas como mitocondrias en medicina) bajo un microscopio para un examen genético y se mantiene su integridad. Si queda claro que el embrión no tiene ninguna enfermedad genética, será trasplantado al útero humano para que siga creciendo y desarrollándose.
Enfermedades genéticas detectables actualmente
Enfermedades cromosómicas: Las enfermedades causadas por anomalías en el número y estructura de los cromosomas se denominan enfermedades cromosómicas. Se conocen más de 300 enfermedades cromosómicas, la mayoría de las cuales van acompañadas de diversos defectos congénitos como retraso del crecimiento, retraso mental, malformaciones y trastornos del desarrollo sexual. Los trastornos cromosómicos no son infrecuentes en la población humana.
Enfermedades genéticas ligadas al cromosoma X: la hemofilia, la distrofia muscular de Duchenne y el daltonismo rojo-verde son clínicamente comunes. La regla de las enfermedades genéticas recesivas ligadas al cromosoma X es que las mujeres portadoras no presentan síntomas o tienen síntomas muy leves, mientras que los hombres portadores están obligados a sufrir la enfermedad.
Anormalidad de un solo gen: El metabolismo material del cuerpo incluye una serie de reacciones bioquímicas complejas, todas las cuales se llevan a cabo con la participación de catalizadores biológicos-enzimas. Si una determinada enzima no se puede sintetizar debido a un defecto genético causado por una mutación genética, o la cantidad o estructura de la síntesis es anormal, un determinado proceso metabólico se bloquea o no puede desarrollarse normalmente, lo cual es un error innato del metabolismo.
Anomalías cromosómicas comunes
Trisomía y haploidía cromosómica: cromosomas 22, 21, 16, 15, 13, XO, XXX, XYY.
Ectopia del equilibrio cromosómico: Ectopia de Rosch
Enfermedades monogénicas comunes
Enfermedades autosómicas recesivas: fibrosis quística, β-talasemia, enfermedad de la médula espinal, distrofia muscular.
Enfermedades autosómicas dominantes: Distrofia miotónica, enfermedad de Huntington, neurofibromatosis, poliposis adenomatosa
Enfermedades ligadas al cromosoma X: Distrofia muscular de Hinds frágil y de Becker, hemofilia.
El 23 de marzo de 2000, nació el primer bebé probeta de tercera generación de China en el Primer Hospital Afiliado de la Universidad Médica Sun Yat-sen. A las 9 en punto de esa noche, una paciente con hemofilia dio a luz a una niña sana en el Hospital No. 1 de Zhongshan.
¿Qué es el PGD (diagnóstico genético preimplantacional)?
¿Cuáles son los beneficios del PGD?
1. La presión psicológica que provoca el aborto.
2. Las cuestiones éticas que provoca el aborto.
3. Los embriones fecundados in vitro se prueban genéticamente antes de su implantación en el útero, y se seleccionan embriones normales para su implantación en la madre.
Ámbito de aplicación del PGD:
1. Enfermedades genéticas de un solo gen
2. Anomalías cromosómicas
3.
p>4. Detección de aneuploidías
Un prerrequisito importante para el PGD:
Proporcionar una estimulación ovárica adecuada para asegurar la extracción del máximo número de ovocitos maduros en orden. obtener un número suficiente de embriones para realizar pruebas. Si se estima que se pueden recuperar menos de 6 ovocitos, se debe cancelar el PGD.
Tecnología central del PGD
1. Muestreo por punción láser (1-2 células embrionarias)
2. Extracción y amplificación de ADN
3.Tecnología de peces (hibridación in situ por fluorescencia): hibridación in situ. Nivel cromosómico
4. PCR (reacción en cadena de la polimerasa): amplificación de un solo gen.
Cómo realizar PGD para enfermedades genéticas de un solo gen;
PGD, PCR combinado con tecnología de secuenciación es un método común para enfermedades genéticas de un solo gen (la eliminación de alelos es un desafío para las enfermedades genéticas de un solo gen). tecnología de PCR celular).
El PGD unicelular en etapa de división puede requerir dos amplificaciones para alcanzar la cantidad requerida de ADN.
El análisis de vinculación juega un papel importante en el PGD. Los fallos de amplificación y la contaminación se han convertido en problemas más destacados en el PGD.
Cómo realizar PGD en estructuras cromosómicas anormales
Las técnicas que se pueden utilizar para detectar anomalías cromosómicas incluyen microarrays FISH, CGH y SNP.
Última tecnología: secuenciación de alto rendimiento NGS
PGS (screening genético preimplantacional)
Primera generación: PGD-hibridación in situ por fluorescencia
p >Las sondas de ADN se utilizan para detectar segmentos locales en 23 pares de cromosomas, que suelen ser los cromosomas representativos 13, 16, 18, 21, 22, X e Y.
Características limitantes:
1. Son pocos los tipos de enfermedades que se detectan en una sola prueba, y sólo se pueden utilizar de 5 a 8 sondas por cada blastómero.
2. Los resultados no son lo suficientemente fiables. El 3% de las blastómeras no tendrán señal y el 5% tendrán resultados falsos.
Hibridación genómica comparada
Principios de la CGH:
1. Preparar simultáneamente el ADN de la muestra a analizar y el ADN genómico humano de cariotipo normal (el las concentraciones deben ser similares).
2. Etiqueta dos tipos de ADN genómico con diferentes tintes fluorescentes.
3. Mezclar los dos ADN genómicos y luego hibridarlos con cromosomas humanos normales en metafase.
4. Detecta la proporción de las dos fluorescencias y calcula el número de copias del ADN.
Segunda generación: Tecnología de hibridación genómica comparativa PGD-aCGH, comúnmente conocida como chip genético
Ventajas de CGH:
Puede detectar 23 cromosomas a la vez.
Desventajas de la CGH: Se requiere amplificación del ADN y puede producirse un fallo de amplificación o contaminación externa.
Limitaciones:
1. No se puede detectar la translocación "equilibrada".
2. No se pueden detectar niveles extremadamente bajos de quimerismo y sus embriones normales pueden ser juzgados erróneamente.
3. Las mutaciones puntuales no se pueden detectar y se pasan por alto una gran cantidad de enfermedades genéticas por mutaciones de un solo gen.
PGD-NGS, tecnología de secuenciación de alto rendimiento
Incluye principalmente la resecuenciación del genoma completo, la secuenciación del exoma completo y la secuenciación de la región objetivo, que pertenece a la categoría de secuenciación de genes de próxima generación. . La tecnología NGS puede localizar genes con precisión en poco tiempo y puede detectar enfermedades cromosómicas y diversas enfermedades de un solo gen (enfermedades autosómicas recesivas, enfermedades autosómicas dominantes, enfermedades ligadas al cromosoma X, tumores hereditarios, etc.) en todo el genoma embrionario. detectar enfermedades causadas por aneuploidía, anomalías en el número de copias y diploidía partenogenética, mejorando así en gran medida las tasas de embarazo y reduciendo las tasas de aborto espontáneo, defectos de nacimiento y riesgos de enfermedades genéticas.
Las ventajas reales de PGD/PGS
Mejorar la tasa de éxito
Después de PGS, la tasa de éxito puede llegar hasta el 76%
Reducir el riesgo de enfermedades genéticas Riesgos
Selección sexual
Reducción de tasas de aborto
Especialmente en pacientes mayores.
Aumentar las tasas de nacidos vivos
Aumentar las tasas de notificación de bebés que regresan a casa.