¿Cuál es la fórmula estructural de la rodamina b? ¿Propiedades químicas?

Categoría: Ciencia e Ingeniería

Análisis:

Métodos de detección rápida in situ y detección en laboratorio de rodamina B (rosa roja) en alimentos

Métodos de detección rápida in situ y de laboratorio de rodamina B (rosa roja) en alimentos

(Instituto de Inspección y Supervisión de Calidad de Productos de Dalian)

1. Definición

La rodamina B es un tinte sintético con color rosa brillante, nombre en inglés: Rodamina B; fórmula molecular C28H31ClN2O3; peso molecular 479.0175; fluorescencia y se utiliza como tinte fluorescente para células de laboratorio, vidrio coloreado, fuegos artificiales especiales y petardos y otras industrias. No se permite teñir alimentos.

2. Principio de detección

La rodamina B es liposoluble y se utiliza como colorante para condimentos (principalmente chile en polvo y aceite de chile). Se producirán residuos al utilizar condimentos contaminados en preparaciones de alimentos. Cuando los condimentos se tiñen con rodamina B, el contenido es mayor o incluso se incorpora directamente, lo que permite realizar pruebas in situ. Debido a su bajo contenido, los alimentos deben enviarse a un laboratorio para su análisis. En las pruebas in situ, se utilizan disolventes orgánicos no polares (como n-hexano, n-hexano + acetona, etc.) para disolverlo y extraerlo. El extracto fluye a través de un cartucho de extracción en fase sólida de alúmina neutra para adsorber la rodamina. B. El disolvente (como n-hexano) se utiliza para eluir la columna pequeña para eluir la grasa de la muestra y las sustancias endógenas que interfieren con los alimentos. Se puede observar una banda rosa brillante en la columna pequeña a simple vista, que se considera una. muestra sospechosa y la muestra debe enviarse a un espacio de experimento para realizar más pruebas de confirmación. Los métodos de prueba de laboratorio todavía utilizan disolventes orgánicos no polares (como n-hexano, n-hexano + acetona, etc.) para disolver y extraer la rodamina B de los alimentos. El extracto fluye a través de un cartucho de extracción en fase sólida de alúmina neutra para adsorber la rodamina. B. Use un solvente orgánico no polar (por ejemplo, n-hexano) para eluir la grasa de la muestra y las sustancias endógenas que interfieren con los alimentos, luego use un solvente orgánico polar (por ejemplo, metanol) para eluir y recolectar la rodamina B de la columna, y use al revés. -Cromatografía líquida de alta resolución en fase-Detector de luz UV/visible para detección cualitativa y cuantitativa.

3. Reactivos y materiales

3.1 Utilice alúmina neutra (malla 100) para cromatografía. Hornee a 105°C durante 2 horas antes de su uso. Retírelo del desecador y enfríelo a temperatura ambiente. botella y colóquela bien.

3,2 n-Hexano (grado analítico);

Acetona (grado analítico);

Metanol (grado cromatográfico); Acetona al 20 % en solución de n-hexano: tomar 100 ml de acetona y agregar 400 ml de n-hexano y mezclar como solución de extracción y solución de purificación de rodamina B.

3.4 Cartucho de extracción de alúmina en fase sólida: Tome un tubo de jeringa de plástico de 5 ml, introduzca un pequeño trozo de algodón absorbente en el puerto inferior, llénelo con alúmina procesada de unos 3 cm de altura y déjelo a un lado para más adelante. usar.

3.5 Solución estándar de Rodamina B: Pesar 5,0 mg de Rodamina B (Reactivo Analítico Puro Shenyang Reagent Factory No. 3), disolverlo con acetona al 20% en n-hexano (3.3) y diluir a 50 ml. y preparar en una solución madre estándar con un contenido de 100 ug/ml. Tome 0, 0,25, 0,5, 1,0, 2,0, 4,0 ml de esta solución, dilúyala con acetona al 20% en solución de n-hexano (3.3) y ajuste el volumen a 50 ml, y prepare la concentración a 0,0, 0,5, 1,0, 2,0. , 4,0, 8,0 ug/ml solución de serie estándar.

3.6 Cristalería

4. Método de detección rápida in situ

4.1 Chile en polvo: Ponga una cucharada pequeña (aproximadamente 5 g) de chile en polvo en un vaso de precipitados pequeño, agregue aproximadamente 40 ml de n-hexano (3.3) que contenga 20 % de acetona, y agite o revuelva durante 2 minutos.

Tome una funda de jeringa de plástico de 5 ml, inserte un pequeño trozo de algodón absorbente en el puerto inferior y vierta la alúmina preprocesada (elemento 3.1) en el tubo de la jeringa de aproximadamente 3 cm de altura para hacer una columna de extracción de alúmina en fase sólida. Espere hasta. está encima del vaso de muestra. Después de la clarificación, viértalo lentamente en la columna pequeña, conecte un vaso de líquido residual en el extremo inferior y vierta de 2 a 5 ml según el color. Tenga cuidado de no verter demasiado y asegúrese de que el color. La parte media e inferior de la columna pequeña todavía es blanca. En este momento, contiene rodamina. La muestra B tendrá una franja fluorescente rosa brillante en la parte superior de la columna, con bordes claros. El color rosa se intensificará y se ampliará a medida que la columna pequeña. El contenido aumenta. El extracto de muestra que no contiene rodamina B no tendrá una franja rosada, solo aparecerá una banda ancha con una interfaz amarilla-roja poco clara, luego vierta lentamente 20 ml de n-hexano (3.3) que contenga 20 % de acetona. en la columna pequeña no se moverá hacia abajo, pero será más clara, y las bandas amarillas-rojas restantes se moverán hacia abajo, la mayor parte se puede eluir y se puede considerar como una muestra sospechosa que contiene rodamina. B.

4.2 Aceite de chile Tome una cucharada pequeña de aceite de chile (aproximadamente 2 g) y póngala en un vaso de precipitados pequeño. Agregue aproximadamente 10 ml de n-hexano (3.2) y mezcle bien. Siga las instrucciones del punto 4.1 "Tome una funda de jeringa de plástico de 5 ml y... podrá juzgar que es una muestra sospechosa que contiene rodamina B".

4.3 Juicio Las muestras sospechosas que inicialmente se consideran que contienen rodamina B deben enviarse al laboratorio para realizar pruebas de confirmación por cromatografía líquida.

5. Métodos de ensayo de laboratorio

5.1. Instrumento

Cromatógrafo líquido de alta resolución (doble bomba, detector de luz UV/visible)

Columna cromatográfica C18 4,6mm X 15cm (5μm)

5.2. Extracción y purificación

5.2.1 Chile en polvo: Tomar 1g de chile en polvo, agregar 20ml de n-hexano (3.3) que contenga 20% de acetona, agitar durante 10 minutos, dejar reposar o filtrar para separar el sobrenadante Añadir 10 ml de n-hexano (3.3) que contenga 20% de acetona al residuo y repetir la extracción una vez. Combinar las dos extracciones, mezclar bien y añadir el sobrenadante a la columna de alúmina (3.4) con un gotero. [la columna está precargada con 5 ml de solución de extracción] (3.3) Humectación], determine la cantidad de carga de la columna dependiendo de la profundidad del color, asegurándose de que la parte media e inferior de la columna pequeña después de cargar la muestra todavía esté blanca El extracto de muestra que contiene rodamina B tendrá una franja fluorescente de color rosa brillante en la parte superior de la columna y la banda rosa se profundiza y se ensancha a medida que aumenta el contenido. El extracto de muestra sin rodamina B no tendrá una banda rosa. Banda ancha poco clara de color amarillo-rojo. Utilice n-hexano que contenga 20% de acetona (3.3). Lave la columna. La banda rosada no se mueve hacia abajo, pero es más clara. El resto de la banda roja-amarilla se mueve hacia abajo. Se puede considerar que es una muestra sospechosa que contiene rodamina B. La salida de la columna a lavar Cuando el líquido sea incoloro, deje caer 5-10 ml de metanol, lave la cinta de rodamina B y recójala. el volumen con metanol, inyectarlo en un cromatógrafo líquido de alta resolución para su confirmación.

5.2.2． Aceite de chile: Pesar 1 g de aceite de chile, agregar 10 ml de n-hexano (3.3) que contenga 20% de acetona, mezclar uniformemente y colocarlo en la columna de alúmina (3.4). Siga las instrucciones del punto 5.2.1 para "usar". un gotero para eliminar el sobrenadante." Agregue el cartucho de alúmina... inyéctelo en un cromatógrafo líquido de alto rendimiento para confirmar" y continúe.

5.2.3 Otros alimentos: Para alimentos condimentados con aceite de pimiento rojo (en polvo) (como productos de soja con aceite rojo, pescado seco con aceite rojo, etc.), pese 10-20 g y utilice acetona al 20 %. Lavar el aceite rojo (polvo) con n-hexano (3.3), o agitar la muestra y el eluyente en un homogeneizado para disolver y extraer la rodamina B. Dejar reposar la muestra líquida o centrifugar, separar la fase orgánica y agregarla. de acuerdo con la cantidad de agua, deshidratar con una cantidad adecuada de sulfato de sodio anhidro y operar de acuerdo con "Use un gotero para agregar el sobrenadante a la columna de alúmina... inyéctelo en un cromatógrafo líquido de alto rendimiento para confirmación" en el artículo. 5.2.1. Para muestras con bajo contenido, la banda rosa es demasiado estrecha y el color es claro y no se puede ver claramente a simple vista. Aún puede utilizar el método anterior y lavar más el cartucho con acetona al 20 % y n-hexano (3.3). hasta que el efluente sea incoloro y agregue de 5 a 10 ml de metanol, lave la cinta de rodamina B y recójala. Después de la concentración, inyéctela en un cromatógrafo de líquidos de alto rendimiento para realizar pruebas de confirmación.

5.3 Condiciones de cromatografía líquida

5.3.1 Columna cromatográfica: C18 4,6 mm % solución acuosa de metanol 1 ml/min

5.3.3 Detector: luz ultravioleta/visible (UV/VIS) detector; longitud de onda: 550 nm

5.3.4 Cualitativo y cuantitativo: estándar de rodamina B El tiempo de retención de la solución fue cualitativo y el método del estándar externo fue cuantitativo.

5.4 Cálculo del resultado

Y = C×V/M

Y——Contenido de rodamina B en la muestra (mg/kg)

C——La concentración de rodamina B encontrada en la curva estándar (ug/ml)

V——El volumen constante total de la muestra de prueba (ml)

M — —Pesaje de cantidad de muestra (g)

5.5 Notas: ① El rendimiento de la columna C18 es diferente y la concentración de la fase móvil debe ajustarse ligeramente. ② Bajo las condiciones de separación dadas por este método, la matriz de la muestra no tiene picos de interferencia cerca de la rodamina B. Muchos otros colorantes azoicos rojos pueden emitir picos después de la rodamina B. Preste atención a ajustar la separación entre estos picos de interferencia y la rodamina B. Interferencia Los ingredientes son: Sudán Naranja G, Sudán Rojo, Sudán Rojo 7B, Sudán Rojo I, Sudán Rojo II, Sudán Rojo III y Sudán Rojo IV.